腸管上皮細胞における自然免疫応答スパイラル機構解析

2014 年度 実績報告書

• 研究領域: 感染・炎症が加速する発がんスパイラルとその遮断に向けた制がんベクトル変換
• 研究課題/領域番号: 25114703
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 土屋 輝一郎 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 寄附講座准教授 (40376786)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: 長期自然免疫応答モデル / Atoh1 / 大腸初代培養 / シグナルスパイラル / 酸化ストレス

研究実績の概要

本邦では潰瘍性大腸炎患者が急増しており、それに伴う発癌患者の増大が懸念されている。炎症発癌の特徴は粘液産生癌が多いことであるが、我々は腸管上皮分化制御因子であるAtoh1の蛋白安定性が粘液産生のみならず、癌幹細胞形質・悪性形質獲得に必須であることを証明した。さらにAtoh1蛋白安定性はTNFαなどNFkBシグナルが関与することを見いだし、持続炎症状態における上皮細胞変化が発癌形質に影響すると考えた。そこで我々は世界で初めてマウス大腸上皮幹細胞の初代培養系を確立し、初代培養細胞における持続炎症刺激モデルを構築した。TNFα, Flagellinの刺激にて一過性のIL-8上昇を認めるが、４週間持続刺激によりIL-8の再上昇を認めたことから自然免疫応答がスパイラル状態にあることを発見した。そこで、本研究では初代培養における応答スパイラル機構を解明し、潰瘍性大腸炎の大腸上皮初代培養細胞によるスパイラル状態評価法を構築することで、免疫応答スパイラルの予防もしくはリセットを行い、炎症発癌の発症を抑制することを目的とする。本年度はマウス大腸初代培養細胞における長期自然免疫応答システムの解析を行い、NFkBシグナル亢進、非可逆性の酸化ストレス状態であることを明らかとした。さらに倫理審査委員会承認のもとヒト小腸・大腸上皮細胞の初代培養系も確立し、炎症性腸疾患患者からの初代培養も開始しておりヒト解析を遂行する環境を整えた。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] uppressing TGFβ signaling in regenerating epithelia in an inflammatory microenvironment is sufficient to cause invasive intestinal cancer (2015)
  • 著者名/発表者名: Oshima H, Nakayama M, Han TS, Naoi K, Ju X, Maeda Y, Robine S, Tsuchiya K, Sato T, Sato H, Taketo MM, Oshima M
  • 雑誌名: Cancer Res 巻: 75 ページ: 766-776
  • DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-14-2036.
  • 査読あり
• [雑誌論文] RIPK3 regulates p62-LC3 complex formation via the caspase-8-dependent cleavage of p62. (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsuzawa Y, Oshima S, Nibe Y, Kobayashi M, Maeyashiki C, Nemoto Y, Nagaishi T, Okamoto R, Tsuchiya K, Nakamura T, Watanabe M
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 456 ページ: 298-304
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.11.075.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Associations of HLA class I alleles in Japanese patients with Crohn's disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Oryoji D, Hisamatsu T, Tsuchiya K, Umeno J, Ueda S, Yamamoto K, Matsumoto T, Watanabe M, Hibi T, Sasazuki T.
  • 雑誌名: Genes Immun. 巻: 16 ページ: 54-6
  • DOI: 10.1038/gene.2014.61.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescent labelling of intestinal epithelial cells reveals independent long-lived intestinal stem cells in a crypt. (2014)
  • 著者名/発表者名: Horita N, Tsuchiya K, Hayashi R, Fukushima K, Hibiya S, Fukuda M, Kano Y, Mizutani T, Nemoto Y, Yui S, Okamoto R, Nakamura T, Watanabe M.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 454 ページ: 493-499
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.10.091.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Distinct expression patterns of Notch ligands, Dll1 and Dll4, in normal and inflamed mice intestine (2014)
  • 著者名/発表者名: Shimizu H, Okamoto R, Ito G, Fujii S, Nakata T, Suzuki K, Murano T, Mizutani T, Tsuchiya K, Nakamura T, Hozumi K, Watanabe M
  • 雑誌名: 2014 巻: 2 ページ: e370
  • DOI: 10.7717/peerj.370.
  • 査読あり
• [学会発表] The Acquisition of Cancer Stemness by Atoh1 in Colitis Associated Cancer (2015)
  • 著者名/発表者名: Kiichiro Tsuchiya, Keita Fukushima, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: 8th Annual World Congress of Regenerative Medicine & Stem Cells
  • 発表場所: 釜山（韓国）
  • 年月日: 2015-03-21 – 2015-03-21
  • 招待講演
• [学会発表] Innate immune spiral of intestinal epithelial cells by the long-term inflammation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya K, Hibiya S, Watanabe M:
  • 学会等名: The 73rd Annual Meeting of the Japanese Cancer Association
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜）
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-25