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2013 年度 実績報告書

脂質メディエーター解析のための新技術の創出

公募研究

研究領域生命応答を制御する脂質マシナリー
研究課題/領域番号 25116702
研究種目

新学術領域研究(研究領域提案型)

研究機関秋田大学

研究代表者

中西 広樹  秋田大学, 生体情報研究センター, 助教 (10466740)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
キーワード質量分析 / 脂質メディエーター
研究概要

本研究では、平成23-24年度新学術領域研究 公募研究のテーマであったマニピュレーターシステムと質量分析計を組み合わせた“単一細胞ダイレクトMS法”をより発展させ、微細組織領域や特定の細胞種群の脂質メディエーターを簡便な手法で解析できる高感度分析法の確立を目指す。そして、種々の組織や細胞において脂質メディエーター産生量がどのように変化し、そこにどのような脂質代謝酵素が関与するのかを明らかにする。当初の研究計画にのっとり、実験を進め、以下の成果が上がった。
1.再現性に優れた脂質メディエーター解析のための迅速・簡便前処理法の改良
非特異的な分解や器具への吸着対策として吸着保護材(天然に存在しない同系統の脂質分子)を用いることで回収率の向上を図った。さらに固層抽出法により最小限のロスで短時間かつ簡便な調整法を確立した。
2.超高感度LC-MS法を用いた脂質メディエーター分析系の確立
流速、カラム、注入量などのLCシステムの最適化ならびに、夾雑物を取り除く(上述)ことで、1細胞レベルから脂質メディエーターならびにその前駆体のグリセロリン脂質を安定的に分析できる新技術を確立した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

当初の計画通り、1細胞レベルでグリセロリン脂質ならびに脂質メディエーターを分析できる高感度分析法を確立し、さらにこの高感度分析法を用いてマウス、ヒト試料での解析を進めている。

今後の研究の推進方策

確立した高感度分析法を用いた応用研究はまだ始まったばかりであり、特にヒト試料の解析にあたっては試料調整法など細かいところを微調整する必要性がある。特定の微細組織領域ならびに細胞種群での脂質メディエーターのフロー(産生・代謝・受容)解析を可能とするため、種、部位ごとの調製・分析方法を再検討する。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2014 2013

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (1件) (うち招待講演 1件)

  • [雑誌論文] ホスノイノシタイド代謝系-新技術による新展開2014

    • 著者名/発表者名
      佐々木雄彦、中西広樹
    • 雑誌名

      医学のあゆみ

      巻: 248 ページ: 1039-1049

  • [雑誌論文] Lipidomic analysis of brain tissues and plasma in a mouse model expressing mutated human amyloid precursor protein/tau for Alzheimer’s disease.2013

    • 著者名/発表者名
      Tajima Y.
    • 雑誌名

      Lipids Health Dis

      巻: 12 ページ: 68-81

    • DOI

      10.1186/1476-511X-12-68

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Lymphoid tissue phospholipase A2 group IID resolves contact hypersensitivity by driving antiinflammatory lipid mediators.2013

    • 著者名/発表者名
      Miki Y.
    • 雑誌名

      J. Exp. Med.

      巻: 210 ページ: 1217-1234

    • DOI

      10.1084/jem.20121887

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Molecular species of phospholipids with very long chain fatty acids in skin fibroblasts of Zellweger syndrome.2013

    • 著者名/発表者名
      Hama K.
    • 雑誌名

      Lipids

      巻: 48 ページ: 1253-1267

    • DOI

      10.1007/s11745-013-3848-5

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 酸性リゾリン脂質を量る2013

    • 著者名/発表者名
      中西広樹
    • 雑誌名

      実験医学別冊

      巻: - ページ: 118-123

  • [雑誌論文] 脂質質量分析の高感度化2013

    • 著者名/発表者名
      中西広樹
    • 雑誌名

      遺伝子MOOK

      巻: 24 ページ: 77-82

  • [学会発表] 酸化関連脂質代謝物の高感度分析法の開発と応用2013

    • 著者名/発表者名
      中西広樹
    • 学会等名
      第55回日本脂質生化学会
    • 発表場所
      ホテル松島大観荘(松島)
    • 年月日
      20130606-20130606
    • 招待講演

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公開日: 2015-05-28  

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