天然変性タンパク質をハブとするカルビン回路高次複合体の構造解析

2014 年度 実績報告書

• 研究領域: 細胞シグナリング複合体によるシグナル検知・伝達・応答の構造的基礎
• 研究課題/領域番号: 25121719
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 松村 浩由 大阪大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (30324809)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: カルビン回路 / 天然変性タンパク質 / 超分子複合体

研究実績の概要

カルビン回路高次複合体の形成によるカルビン回路酵素の協調的な阻害、ならびに天然変性蛋白質CP12の段階的折り畳み機構を解明するために、ホスホリブロキナーゼ（PRK）単体のX線結晶構造解析に続いて、PRKの反応機構を決定すべくPRK基質アナログ複合体の構造解析を行った。その結果、PRKのリン酸転移反応機構を解明できた。さらに、グリセルアルデヒド　3-リン酸デヒドロゲナーゼ(GAPDH）とCP12に、どのようにPRKが結合し、さらにCP12が連続して折りたたまれるのかを解明すべく、CP12の部位特異的変位体を5種作成し、Native-PAGEによる結合実験と表面プラズモン共鳴法を用いたキネティクス解析を行った。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] The N-terminal acidic residue of the cytosolic helix 8 of an odorant receptor is responsible for different response dynamics via G-protein (2015)
  • 著者名/発表者名: T. Kawasaki, T. Saka, S. Mine, E. Mizohata, T. Inoue, H. Matsumura, T. Sato
  • 雑誌名: FEBS Lett. 巻: 589 ページ: 1136-1143
  • DOI: 10.1016/j.febslet.2015.03.025
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] A comparative analysis of microgravity and earth grown thermostable T1 lipase crystals using HDPCG apparatus (2015)
  • 著者名/発表者名: R.N. Abd Rahman, M.S. Ali, S. Sugiyama, A.T. Leow, T. Inoue, M. Basri, A.B. Salleh, and H. Matsumura
  • 雑誌名: Protein Pept. Lett. 巻: 22 ページ: 173-179
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystal structure of FtsA from Staphylococcus aureus (2014)
  • 著者名/発表者名: J. Fujita, Y. Maeda, C. Nagao, Y. Tsuchiya, Y. Miyazaki, M. Hirose, E. Mizohata, Y. Matsumoto, T. Inoue, K. Mizuguchi, and H. Matsumura
  • 雑誌名: FEBS Lett. 巻: 588 ページ: 1879-1885
  • DOI: 10.1016/j.febslet.2014.04.008
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Structural basis for the recognition-evasion arms race between Tomato mosaic virus and the resistance gene Tm-1 (2014)
  • 著者名/発表者名: K. Ishibashi, Y. Kezuka, C. Kobayashi, M. Kato, T. Inoue, T. Nonaka, M. Ishikawa, H. Matsumura, and E. Katoh
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 巻: 111 ページ: E3486-E3495
  • DOI: 10.1073/pnas.1407888111
  • 査読あり
• [学会発表] MRSA由来細胞分裂タンパク質FtsAの構造―機能相関解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤田純三、前田陽子、齋藤有紀、清水伸隆、野田勝紀、長尾知生子、土屋裕子、溝端栄一、内山進、松本佳巳、水口賢司、井上豪、松村浩由
  • 学会等名: 日本結晶学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-11-01 – 2014-11-03
• [学会発表] MRSA由来細胞分裂タンパク質FtsAのX線結晶構造解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤田純三、前田陽子、宮﨑祐満、廣瀬未果、溝端栄一、井上豪、松村浩由
  • 学会等名: 日本蛋白質科学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-06-25 – 2014-06-27