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2014 年度 実績報告書

分子量約1000万の巨大粒子ボルトの脂質ラフト認識機構の解明

公募研究

研究領域細胞シグナリング複合体によるシグナル検知・伝達・応答の構造的基礎
研究課題/領域番号 25121721
研究機関大阪大学

研究代表者

田中 秀明  大阪大学, たんぱく質研究所, 准教授 (40346169)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2015-03-31
キーワードボルト / 自然免疫 / 脂質ラフト / X線結晶構造解析
研究実績の概要

Vault(ボルト)は、3種類のタンパク質(MVP、VPARP、TEP1)と1種類のRNA(vRNA)で構成される分子量約1000万の巨大な核酸-タンパク質複合体で、幅広い高等生物に存在する。我々が2009年に3.5A分解能で決定したボルトの全体構造からボルトが脂質ラフトに結合する可能性を示すことができた。したがって、本研究では脂質ラフト構成成分との複合体の立体構造を決定し、ボルトによる脂質ラフト認識機構の解明を目指した。また、より詳細な議論が出来るように、昆虫細胞で発現したMVPのみで構成されるボルト粒子(ボルト外殻)の全体構造の2.8A分解能以上での構造決定も目指した。コレステロールを含む様々な成分との共結晶化を試みたが、これまでに結合が確認された成分はない。高分解能での構造決定を目指した研究では、フレキシブルなMVP・N末端をロイシンジッパーで固定したLZ-ボルトを用いて結晶化を行い、SPring-8のビームラインBL44XUにて回折実験を行った結果、最高で2.8A分解能の反射を得ることに成功した。現在は、多くの結晶を用いて高分解能回折強度データの収集を行っている。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2015 2014

すべて 学会発表 (4件) 産業財産権 (1件) (うち外国 1件)

  • [学会発表] Crystal Structure of Photosystem I from Synechocystis sp. PCC6803 at 5.1 Å Resolution2015

    • 著者名/発表者名
      河合(久保田)寿子、坂本由佳、和田元、田中秀明、栗栖源嗣
    • 学会等名
      日本化学会第95春季年会
    • 発表場所
      日本大学 理工学部船橋キャンパス/薬学部
    • 年月日
      2015-03-26 – 2015-03-29
  • [学会発表] 光化学系Iとフェレドキシンが形成する電子伝達複合体の構造基盤2014

    • 著者名/発表者名
      河合(久保田)寿子、武藤梨沙、池上貴久、Marc Nowaczyk、Matthias Rögner、田中秀明、栗栖源嗣
    • 学会等名
      平成26年度日本結晶学会年会
    • 発表場所
      東京大学農学部
    • 年月日
      2014-11-01 – 2014-11-03
  • [学会発表] X-ray structure and NMR analysis of the electron transfer complex between photosystem I and ferredoxin2014

    • 著者名/発表者名
      Risa Mutoh, Hisako Kubota-Kawai, Marc Nowaczyk, Matthias Rögner, Hideaki Tanaka, Takahisa Ikegami, Genji Kurisu
    • 学会等名
      第52回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター
    • 年月日
      2014-09-25 – 2014-09-27
  • [学会発表] 光化学系I-フェレドキシン複合体の構造解析2014

    • 著者名/発表者名
      武藤梨沙、久保田(河合)寿子、田中秀明、池上貴久、栗栖源嗣
    • 学会等名
      第22回 「光合成セミナー2014:反応中心と色素系の多様性」
    • 発表場所
      名古屋工業大学
    • 年月日
      2014-07-12 – 2014-07-13
  • [産業財産権] Artificial Bioparticle and Method of Manufacturing the Same2015

    • 発明者名
      田中秀明
    • 権利者名
      田中秀明
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      PCT/JP2013/080219
    • 出願年月日
      2015-03-23
    • 外国

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公開日: 2016-06-01  

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