公募研究
SMCタンパク質は、主として非コードDNA領域に存在し、クロマチン構造の決定に中心的な役割を担っているATPaseである。本研究の目的とするところは、SMCのはたらきを機軸とし、Ｍ期染色体の構築に向けたコヒージョンがいかに制御されているかを明らかにすることである。昨年度に行ったChIP-sequence解析から、非コードDNA領域にはSMCタンパク質とともに複製によって生じるDNAの絡まりを解除するトポイソメラーゼII―alpha（トポ２）が濃縮することを見出した。このことから本年度はトポ２とSMCタンパク質（コンデンシン複合体及びSMC5/6複合体）との関連を解析した。これまでの研究でトポ２はＭ期染色体の中軸においてコンデンシン複合体と共局在することが分かっているので、コンデンシンとの相互作用を免疫沈降実験により調べた。その結果、Ｍ期特異的にコンデンシンIIがトポ２と結合することが示唆された。それぞれの変異体を作成して結合解析を進めたところ、結合ドメインが見出された。その結合ドメインの生物種間の比較、および３次元構造予測データから、結合に必須のアミノ酸配列を特定した。コンデンシンIIとトポ２の結合の意義を明らかにすべく、その点変異体の細胞表現型の解析を進めている。Smc5/6複合体については、それを不活性化すると、非コード領域に生じた未解構造を解消できなくなり、染色体が適正に構築されず分配の際に無数のDNAブリッジを発生することを見出した。複製過程に生じるDNAの未解構造unresolved structuresを解消して独立した姉妹染色分体を形成するうえでこれらのSMCタンパク質が不可欠な役割を担っていることが示唆された。
27年度が最終年度であるため、記入しない。
すべて 2015 その他
すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 2件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (5件) (うち招待講演 5件) 備考 (2件)
Nature Cell Biology
巻: 17 ページ: 711-713
10.1038/ncb3183
Current Biology
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http://www.jfcr.or.jp/tci/exppathol/
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