研究実績の概要 |
私たちは、分裂酵母の減数分裂において、非コードRNA であるmeiRNAが染色体の特定の部位sme2遺伝子座に蓄積し、減数分裂に必須な相同染色体の対合に寄与することを発見した。本研究は、染色体上のsme2遺伝子座に蓄積したmeiRNAの結合タンパク質を同定し、その役割を理解することによって、クロマチン機能における非コードRNAの機能を明らかにすることを目的とする。 平成26年度までに、GFP融合タンパク質ライブラリを利用してmeiRNAと共局在する因子を検索し、相同染色体の対合に影響を与えるものをいくつか同定した。この中には、RNAのポリA付加に関与する因子群が含まれた。平成27年度は、ゲノムワイドに約100kbp間隔でlacOリピート配列を挿入した一群の細胞株を作成し、この一群の細胞株を活用して、生細胞イメージングを行ったところ、meiRNA共局在因子が染色体上の特定の領域に結合することを明らかにした(未発表)。 また高分解能でクロマチン構造を観察するために、超分解能顕微鏡法として3D-SIM (3次元Structured Illumination Microscope)を用い、分裂酵母の減数分裂期の染色体をトレースすることを実現した。コヒーシンなどの変異体でクロマチン構造をイメージングすると共に、sme2遺伝子座の対合への影響を解析し、コヒーシンが作るクロマチン構造が相同染色体対合に必須であることを示した(Ding et al., 投稿中)。また3D-SIMを用いて、分裂酵母のテロメア近傍の高度に凝縮したクロマチン構造や、クロマチンの軸となる新規な構造を明らかにした。これらの成果は論文としてNature Communication 誌およびScientific Reports誌に掲載された(Matsuda et al., 2015;Poonperm et al., 2015)。
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