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2009 Fiscal Year Annual Research Report

卵子による核の初期化機構の解明およびその促進方法の開発

Planned Research

Project AreaThe germline: its developmental cycle and epigenome network
Project/Area Number 20062015
Research InstitutionThe Institute of Physical and Chemical Research

Principal Investigator

若山 照彦  The Institute of Physical and Chemical Research, ゲノム・リプログラミング研究チーム, チームリーダー (40360672)

Keywords応用動物 / 再生医学 / 獣医学 / 畜産学 / 発生・分化
Research Abstract

本研究は卵子による核の初期化機構の解明を目指すと同時に初期化の促進方法を開発し、体細胞核の完全初期化およびクローン動物特有の異常が生じない健全な個体を高率に作出することを目指している。2009年度には(1) 以前我々は初期化を促進させるためにTSA(HDACiの一種)処理が効果的だと報告したが、この方法では近交系マウスのクローンは不可能だった。今回Scriptaid(別のHDACi)処理によって主要な近交系マウス全てからクローン個体の作出に成功した。さらにScriptaid処理によって2細胞期のRNA合成が活発になること、ヒストンH3K9のアセチル化の割合が未処理クローン胚より受精卵に近づくことなどが明らかとなった(Van Thaun et a1., 2009)。(2) クローン胚および個体には異常が多発することが知られているが、これまでは胚を固定、染色して異常を調べなければならず、調べた胚がはたして個体へ発生できたのか不明だった。そこで胚を生きたまま観察し、その後個体へ発生させることが可能な特殊顕微鏡および観察方法を確立した。具体的には超高感度カメラおよびGFPなどの蛍光色素遺伝子を結合したの的遺伝子のmRNAを胚に注入することで、チューブリンやヒストンを観察可能にし、5万枚以上の蛍光写真を撮影後に産仔への発育を可能にした(Yamagata et al 2009)。(3) クローン研究には必須の卵子の初期化能力を測定するために、核にダメージを与えず卵子活性化能だけを消失した精子の作出を試みた。その結果、精子を10mMのNaOH処理を1時間行うことで、出産率の低下を起こさないで卵子活性化能力を完全に除去した精子を作り出せることがわかった(Li et al., 2009)。

  • Research Products

    (13 results)

All 2010 2009 Other

All Journal Article (11 results) (of which Peer Reviewed: 11 results) Presentation (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] An Efficient Method for Generating Transgenic Mice Using NaOH-Treated Spermatozoa2010

    • Author(s)
      Li et al.
    • Journal Title

      Biol Reprod 82

      Pages: 331-340

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Preservation of sperm within the mouse cauda epididymidis in salt or sugars at room temperature2010

    • Author(s)
      Ono et al.
    • Journal Title

      Zygote (In press)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A role for the elongator complex in zygotic paternal genome demethylation2010

    • Author(s)
      Okada et al.
    • Journal Title

      Nature 46

      Pages: 554-558

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Production of normal mice from spermatozoa denatured with high alkali treatment before ICSI2009

    • Author(s)
      Li et al.
    • Journal Title

      Reproduction 137

      Pages: 779-792

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Long-term, Six-dimensional Live-cell Imaging for the Mouse Preimplantation Embryo That Does Not Affect Full-term Development2009

    • Author(s)
      Yamagata et al.
    • Journal Title

      J Reprod Dev 55

      Pages: 343-350

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effect of Vanadate on the Chromatin Configuration in Pig G V-oocytes2009

    • Author(s)
      Bui et al.
    • Journal Title

      J Reprod Dev 55

      Pages: 571-584

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The histone deacetylase inhibitor scriptaid enhances nascent mRNA production and rescues full-term development in cloned inbred mice2009

    • Author(s)
      Van Thuan et al.
    • Journal Title

      Reproduction 138

      Pages: 309-317

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Assessment of chromosomal integrity using a novel live-cell imaging technique in mouse embryos produced by intracytoplasmic sperm injection2009

    • Author(s)
      Yamagata et al.
    • Journal Title

      Hum.Reprod 24

      Pages: 2490-2499

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Detrimental Effects of Microgravity on Mouse Preimplantation Development in Vitro2009

    • Author(s)
      Wakayama et al.
    • Journal Title

      PloS ONE 4

      Pages: e6753

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Male Germline and Embryonic Stem Cell Lines from NOD Mice : Efficient Derivation of GS Cells from a Nonpermissive Strain for ES Cell Derivation2009

    • Author(s)
      Ohta et al.
    • Journal Title

      Biol.Reprod 81

      Pages: 1147-1153

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Establishment of trophoblast stem cell lines from somatic cell nuclear-transferred embryos2009

    • Author(s)
      Oda et al.
    • Journal Title

      Proc Natl Acad Sci USA 106

      Pages: 16293-16297

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Nuclear transfer ES cells as a new tool for basic biology2009

    • Author(s)
      Wakayama T.
    • Organizer
      The sixth fifth Annual Meeting of Asian Reproductive Biotechnology Society
    • Place of Presentation
      Siem Reap City, Cambodia
    • Year and Date
      20091116-20091118
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.riken.jp/r-world/info/release/press/2009/090825/index.html

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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