2020 Fiscal Year Annual Research Report
Visualization of interglial signal transduction
| Project Area | Glia decoding: deciphering information critical for brain-body interactions |
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| Project/Area Number |
20H05898
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
松田 道行 京都大学, 生命科学研究科, 教授 (10199812)
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| Project Period (FY) |
2020-11-19 – 2025-03-31
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| Keywords | 細胞間情報伝達 / FRETバイオセンサー / グリア / ERK / マップキナーゼ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
初年度は、グリア特異的なバイオセンサー発現の準備を行った。まず、アストログリア特異的にCREを発現するGlast-CreER（アストロサイト）をHelmholtZentrum munchenから導入した。さらに、ミクログリア特異的にCREを発現するCx3Cr1-CreERを名古屋大学から導入した。これらのマウスを繁殖させ、ゲノタイピングで系統を維持できることを確認し、CRE依存性にERKマップキナーゼのFRETバイオセンサーを発現できるマウスと交配を開始した。一方、神経組織でのFRETイメージングの条件設定のために、マウス網膜組織でのFRETイメージングを行った。代謝のマスター制御因子であるAMPKのFRETバイオセンサーを発現するトランスジェニックマウスから網膜を単離し95%酸素/5%二酸化炭素下で多光子顕微鏡を用いてイメージングを行った。同様にATPのFRETバイオセンサーであるGO-ATeam2を発現するトランスジェニックマウスからも網膜を単離し、多光子顕微鏡を用いてイメージングを行った。解糖系の阻害薬である2-DGを投与したところ、AMPKの活性化とATPの減少が観察された。興味深いことに、この効果は杆体視細胞において錐体視細胞よりも強かった。また、杆体視細胞におけるAMPK活性化とATP現象は30分程度でピークに達し、約2時間で元に戻ることがわかった。このことは杆体視細胞は2時間程度で解糖系への依存度が下がることを意味している。また、この研究において、神経組織での多光子顕微鏡を使ったFRETイメージングの条件を確立することができた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
COVID-19の影響もあり、マウスの導入が遅れたことが影響した。
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| Strategy for Future Research Activity |
新規のCRE遺伝子発現マウスの導入以外は予定通り進行している。
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