生殖腺の性差構築と維持機構の解明

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project Area: Molecular mechanisms for establishment of sex differences.
• Project/Area Number: 22132007
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Research Institution: National Institute for Basic Biology
• Principal Investigator: 田中 実 基礎生物学研究所, 生殖遺伝学研究室, 准教授 (80202175)
• Keywords: 性分化 / ホルモン / 生殖腺 / メダカ / AMH

Research Abstract

生殖腺を構成する各種細胞が蛍光で可視化できるトランスジェニックメダカの確立と維持、さらには変異体との交配を行った。その結果、野生型のトランスジェニックと変異体のトランスジェニックの系統が揃うこととなった。これらについて、性ホルモンを用いて表現型としての全雌集団と全雄集団が得られるよう処理を行い、その条件を検討した。さらに、雌雄判別のゲノムタイピングのプライマー設計とPCRの条件検討を行った。これらの結果により,表現型の性と遺伝レベルの性とが簡便に多数の個体で判別できるようになりつつある。一方,確立しつつあるメダカトランスジェニックの生殖腺における細胞の挙動を共焦点レーザー顕微鏡で詳細な解析を行い、各細胞の組織構築過程を単一細胞レベルで調べると共に、どのステージの生殖腺から細胞を単離すべきか検討を継続している。そのためにトランスジェニックメダカの単離生殖腺から、細胞を解離させる適切な条件、少量の細胞からcDNAをバイアスなしに作製する方法,さらには解離した細胞をセルソーターで純化するために条件の総合的な検討を行った。またメダカはマイクロアレイが不完全であるので、現在のゲノム情報を統合的解析し、質の良いマイクロアレイ作製の検討を行なっている。

Research Products

• [Journal Article] High-resolution melting curve analysis for rapid detection of mutations in Medaka TILLING library (2010)
  • Author(s): Ishikawa, et al
  • Journal Title: BMC Mol.Biol. Volume: 11 Pages: 70-70
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of germline stem cells in the ovary of teleost medaka (2010)
  • Author(s): Nakamura, et al
  • Journal Title: Science Volume: 328 Pages: 1561-1563
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Transcriptional rewiring of the sex determining dmrt1 gene duplicate by transposable elements (2010)
  • Author(s): Herpin, et al
  • Journal Title: PLoS Genetics Volume: 6 Pages: e1000844
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Transcriptional rewiring of the sex determining dmrt1 gene duplicate by transposable elements (2010)
  • Author(s): Herpin, et al
  • Journal Title: Exp.Anim. Volume: 59 Pages: 13-23
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] メダカ卵巣の配偶子幹細胞 (2010)
  • Author(s): 中村, ら
  • Journal Title: 細胞工学 Volume: 29 Pages: 664-669
• [Presentation] Germline Stem Cells in Medaka Ovary (2011)
  • Author(s): Minoru TANAKA
  • Organizer: NUS Seminar in Singapore
  • Place of Presentation: National Univ.of Singapore(シンガポール)
  • Year and Date: 2011-03-16
• [Presentation] メダカ研究から見える性の多様性 (2011)
  • Author(s): 田中実
  • Organizer: 琉球大学熱帯生物圏研究センター主催シンポジウム
  • Place of Presentation: 琉球大学瀬底研究所(沖縄県)
  • Year and Date: 2011-02-23
• [Presentation] 生殖細胞性分化機能とニッチ構造との関わり (2011)
  • Author(s): 田中実
  • Organizer: 名古屋大学GCOEセミナー
  • Place of Presentation: 名古屋大学大学院生命科学研究科(愛知県)
  • Year and Date: 2011-01-21
• [Presentation] 性をつかさどる生殖細胞 (2011)
  • Author(s): 田中実
  • Organizer: 第3回性差生物研究会
  • Place of Presentation: 九州大学医学研究院(福岡県)
  • Year and Date: 2011-01-17
• [Presentation] 生殖腺の性差構築と維持機構の解明 (2010)
  • Author(s): 田中実
  • Organizer: 「性差生物」公開シンポジウム
  • Place of Presentation: 総合研究大学院大学(神奈川県)
  • Year and Date: 2010-12-15
• [Presentation] Germline Cradles Expressing Sox9b Harbor Germline Stem Cells in the Ovary of Teleost Fish, Medaka (2010)
  • Author(s): Minoru TANAKA
  • Organizer: Cold Spring Habour Meeting
  • Place of Presentation: New York (USA)
  • Year and Date: 2010-10-06
• [Presentation] 生殖と性をつかさどる細胞たち (2010)
  • Author(s): 田中実
  • Organizer: 基礎生物学研究所一般公開
  • Place of Presentation: 岡崎コンファレンスセンター(愛知県)(特別講演)
  • Year and Date: 2010-10-03
• [Presentation] The Plasticity of Sex (2010)
  • Author(s): Minoru TANAKA
  • Organizer: JSDB-SDB Joint-Meeting
  • Place of Presentation: Albuquerque, NM (USA)
  • Year and Date: 2010-08-07
• [Book] モデル動物利用マニュアル-生物機能モデルと新しいリソース・リサーチツール「BAC やfosmidを用いたトランスジェニックメダカ作製法」 (2010)
  • Author(s): 田中, ら
  • Total Pages: 573-578(671)
  • Publisher: エル・アイ・シー
• [Remarks]
  • URL: http://www.nibb.ac.jp/reprogenetics/