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2015 Fiscal Year Annual Research Report

フルイディクスを駆使する高速細胞アセンブリ

Planned Research

Project AreaHyper Bio Assembler for 3D Celluler Innovation
Project/Area Number 23106007
Research InstitutionChiba University

Principal Investigator

関 実  千葉大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (80206622)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山田 真澄  千葉大学, 工学(系)研究科(研究院), 准教授 (30546784)
Project Period (FY) 2011-04-01 – 2016-03-31
Keywordsマイクロ流体工学 / ハイドロゲル / 生体組織工学 / 細胞外基質 / 共培養 / バイオマテリアル / 肝細胞
Outline of Annual Research Achievements

本年度は,当プロジェクトの5年間にわたる総括をめざし,昨年度に引き続き,これまでに作製した異方性ハイドロゲル材料の更なる機能化と,単位組織の集積化・複合化による生体構造を模倣した組織の作製を行った。まず肝小葉ブロックの作製においては,肝細胞を内包するハイドロゲルファイバーを束状にし,潅流型チャンバー内にパッキングし,潅流培養を行うことで,肝細胞の機能維持および生存率の評価を行った。特に酸素濃度をモニタリングしつつ潅流培養することによって,生体の酸素消費をある程度再現できることが示唆された。また定量的PCRおよび免疫学的染色によって,流量が細胞機能に与える影響を評価した。さらに血管組織の作製については流路構造の内部に形成したハイドロゲル層を利用した血管組織を作製し,潅流培養を可能とする手法の確立を行い,機能評価を行ったほか,マイクロ流路技術および膜乳化法を用いて作製した微小なECM(コラーゲン)粒子を利用し,血管内皮細胞と複合化した状態で潅流培養を行うことで,内部に導管としての毛細血管網を形成したブロック状組織体の作製を実証した。
さらに,微小なECM粒子の作製と,それを用いた3次元組織構築に関する基礎的な知見を得ることができた。特に,直径数マイクロメートルの架橋コラーゲン微粒子を用いた組織構築として,微粒子を内包する肝細胞ヘテロスフェロイドの形成,膵β細胞集塊の形成,平面状の肉厚組織の形成,を行い,それぞれ細胞の機能評価を行った。また,繊維状ECM材料を作製し,3次元細胞培養における有用性を実証できた。特に肝細胞組織については,薬物代謝評価や動物移植実験を行う際に有用であることが示唆された。以上の検討から,マイクロフルイディクス技術の3次元生体組織構築における有用性を,基礎的材料設計から潅流培養による細胞機能の発現に至る広い段階において実証することができたと言える。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (35 results)

All 2016 2015 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results,  Acknowledgement Compliant: 6 results) Presentation (28 results) (of which Int'l Joint Research: 10 results,  Invited: 2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Enhancement of Osteoblastic Differentiation in Alginate Gel Beads with Bioactive Octacalcium Phosphate Particles2015

    • Author(s)
      Kosei Endo, Takahisa Anada, Masumi Yamada, Minoru Seki, Keiichi Sasaki, and Osamu Suzuki
    • Journal Title

      Biomedical Materials

      Volume: 10 (6) Pages: 065019

    • DOI

      10.1088/1748-6041/10/6/065019

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Cell-sized condensed collagen microparticles for preparing microengineered composite spheroids of primary hepatocytes2015

    • Author(s)
      Masumi Yamada, Ayaka Hori, Sari Sugaya, Yuya Yajima, Rie Utoh, Masayuki Yamato, and Minoru Seki
    • Journal Title

      Lab on a Chip

      Volume: 15 (19) Pages: 3941-3951

    • DOI

      10.1039/c5lc00785b

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Formation of Monodisperse Hierarchical Lipid Particles Utilizing Microfluidic Droplets in a Non-equilibrium State2015

    • Author(s)
      Masahiro Mizuno, Taro Toyota, Miki Konishi, Yoshiyuki Kageyama, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Journal Title

      Langmuir

      Volume: 31 (8) Pages: 2334-2341

    • DOI

      10.1021/acs.langmuir.5b00043

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] On-chip fabrication and magnetic force estimation of peapod-like hybrid microfibers using a microfluidic device2015

    • Author(s)
      Tao Sun, Chengzhi Hu, Masahiro Nakajima, Masaru Takeuchi, Minoru Seki, Tao Yue, Qing Shi , Toshio Fukuda, Qiang Huang
    • Journal Title

      Microfluidics and Nanofluidics

      Volume: 18 (5) Pages: 1177-1187

    • DOI

      10.1007/s10404-014-1511-y

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Patterning of Multilayered Micro Hydrogels on PDMS Substrates Partially Embedding CaSO4 Powders2015

    • Author(s)
      Yuki Watabe, Yuya Yajima, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Journal Title

      Proc. MicroTAS 2015

      Volume: 1 Pages: 1434-1436

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Fabrication of Vascular Tissue Models by Depositing Alginate Hydrogel Layer on PDMS Channels Embedding Barium Salt Powders2015

    • Author(s)
      Keita Kinoshita, Masumi Yamada and Minoru Seki
    • Journal Title

      Proc. MicroTAS 2015

      Volume: 1 Pages: 135-137

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] コラーゲン微粒子を導入した複合型3次元肝組織の作製と機能評価2016

    • Author(s)
      矢嶋祐也,山田真澄,堀綾香,菅谷紗里,鵜頭理恵,関 実
    • Organizer
      第15回日本再生医療学会総会
    • Place of Presentation
      大阪国際会議場
    • Year and Date
      2016-03-17 – 2016-03-19
  • [Presentation] マイクロフルイディクスを利用する微粒子合成・分級操作の新展開2016

    • Author(s)
      山田真澄,関 実
    • Organizer
      化学工学会反応工学部会マイクロ化学プロセス分科会
    • Place of Presentation
      エビスビルAAホール本館,大阪
    • Year and Date
      2016-03-16 – 2016-03-16
    • Invited
  • [Presentation] マイクロステンシルプレートを利用したコラーゲン薄膜の作製と応用2016

    • Author(s)
      橋本里奈,木下敬太,水落雅人,矢嶋祐也,山田真澄,関 実
    • Organizer
      化学工学会 第81年会
    • Place of Presentation
      関西大学千里山キャンパス
    • Year and Date
      2016-03-13 – 2016-03-15
  • [Presentation] コラーゲン粒子を用いたシート状3次元組織の作製2016

    • Author(s)
      矢嶋祐也,山田真澄,堀綾香,関 実
    • Organizer
      シンポジウム:細胞アッセイ技術の現状と将来
    • Place of Presentation
      東京大学生産技術研究所
    • Year and Date
      2016-01-19 – 2016-01-19
  • [Presentation] 血圧の再現を可能とする小口径多層血管モデルの作製と機能評価2016

    • Author(s)
      木下敬太,山田真澄,関 実
    • Organizer
      シンポジウム:細胞アッセイ技術の現状と将来
    • Place of Presentation
      東京大学生産技術研究所
    • Year and Date
      2016-01-19 – 2016-01-19
  • [Presentation] 無機塩を包埋したシリコーン樹脂製流路を利用した血管組織の作製2015

    • Author(s)
      木下敬太,岩瀬優輝,山田真澄,関 実
    • Organizer
      化学工学会 群馬大会2015
    • Place of Presentation
      群馬県桐生市民会館
    • Year and Date
      2015-11-27 – 2015-11-28
  • [Presentation] コラーゲンマイクロ粒子を用いた細胞の立体的シート培養法の開発2015

    • Author(s)
      矢嶋祐也,山田真澄,堀綾香,関 実
    • Organizer
      化学とマイクロ・ナノシステム学会 第32回研究会
    • Place of Presentation
      福岡県北九州国際会議場
    • Year and Date
      2015-11-26 – 2015-11-27
  • [Presentation] マイクロフルイディクスを駆使したバイオマテリアルの微細加工2015

    • Author(s)
      矢嶋祐也,山田真澄,関 実
    • Organizer
      化学とマイクロ・ナノシステム学会 第32回研究会
    • Place of Presentation
      福岡県北九州国際会議場
    • Year and Date
      2015-11-26 – 2015-11-27
  • [Presentation] One-Step Microfluidic Spinning of Collagen Microfibers and Their Application to Cell Cultivation2015

    • Author(s)
      Sakiko Enomoto, Yuya Yajima, Yuki Watabe, Masumi Yamada, Kazuya Furusawa, and Minoru Seki
    • Organizer
      26th 2015 International Symposium on Micro-Nano Mechatronics and Human Science (MHS 2015)
    • Place of Presentation
      Nagoya University
    • Year and Date
      2015-11-23 – 2015-11-25
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Morphology Control of Protein Microparticles Produced Using Microfluidic Droplets in a Non-equilibrium State2015

    • Author(s)
      Masumi Yamada, Kazuma Takahashi, Ayaka Hori, Sari Sugaya and Minoru Seki
    • Organizer
      26th 2015 International Symposium on Micro-Nano Mechatronics and Human Science (MHS 2015)
    • Place of Presentation
      Nagoya University
    • Year and Date
      2015-11-23 – 2015-11-25
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Creation of Multilayered Cellular Constructs Using ECM Microparticles as a Binder2015

    • Author(s)
      Yuya Yajima, Ayaka Hori, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Organizer
      Asian Congress on Biotechnology 2015 (ACB 2015)
    • Place of Presentation
      Kuala Lumpur, Malaysia
    • Year and Date
      2015-11-15 – 2015-11-19
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Fabrication of Capillary-embedding Cellular Blocks for Bottom-Up Tissue Engineering2015

    • Author(s)
      Mari Miyazaki, Ayaka Hori, Yuya Yajima, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Organizer
      Asian Congress on Biotechnology 2015 (ACB 2015)
    • Place of Presentation
      Kuala Lumpur, Malaysia
    • Year and Date
      2015-11-15 – 2015-11-19
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 微粒子状スキャホールドを用いたシート状ヘテロ生体組織の作製2015

    • Author(s)
      矢嶋祐也,山田真澄,堀綾香,関 実
    • Organizer
      第37回日本バイオマテリアル学会大会
    • Place of Presentation
      京都テルサ
    • Year and Date
      2015-11-09 – 2015-11-10
  • [Presentation] コラーゲン微粒子を用いた毛細血管包埋3次元ブロック状組織の形成2015

    • Author(s)
      宮崎満理,堀綾香,矢嶋祐也,山田真澄,関 実
    • Organizer
      第67回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      鹿児島県城山観光ホテル
    • Year and Date
      2015-10-26 – 2015-10-26
  • [Presentation] 微粒子状ECMタンパク質スキャホールドを利用する立体的ヘテロ生体組織の作製2015

    • Author(s)
      矢嶋祐也,堀綾香,山田真澄,関 実
    • Organizer
      第67回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      鹿児島県城山観光ホテル
    • Year and Date
      2015-10-26 – 2015-10-26
  • [Presentation] Patterning of Multilayered Micro Hydrogels on PDMS Substrates Partially Embedding CaSO4 Powders2015

    • Author(s)
      Yuki Watabe, Yuya Yajima, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Organizer
      The 19th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (MicroTAS 2015)
    • Place of Presentation
      Gyeongju, Korea
    • Year and Date
      2015-10-25 – 2015-10-29
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Fabrication of Vascular Tissue Models by Depositing Alginate Hydrogel Layer on PDMS Channels Embedding Barium Salt Powders2015

    • Author(s)
      Keita Kinoshita, Masumi Yamada and Minoru Seki
    • Organizer
      The 19th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (MicroTAS 2015)
    • Place of Presentation
      Gyeongju, Korea
    • Year and Date
      2015-10-25 – 2015-10-29
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Fabrication of Perfusable Multilayered Vascular Tissue Models Using Microengineered Hydrogels2015

    • Author(s)
      Masumi Yamada, Keita Kinoshita, Kenta Yamakoshi, Masaki Iwase, Yuya Yajima, and Minoru Seki
    • Organizer
      The 21st Symposium of Young Asian Biochemical Engineers’ Community (YABEC 2015)
    • Place of Presentation
      Elysian Gangchon Resort, Korea
    • Year and Date
      2015-10-14 – 2015-10-16
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of 3D Liver Cell Culture System Utilizing Hydrogel Microfibers as Building Blocks2015

    • Author(s)
      Yuya Yajima, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Organizer
      The 21st Symposium of Young Asian Biochemical Engineers’ Community (YABEC 2015)
    • Place of Presentation
      Elysian Gangchon Resort, Korea
    • Year and Date
      2015-10-14 – 2015-10-16
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 多層状パターン化ハイドロゲルの作製と高密度細胞共培養への応用2015

    • Author(s)
      渡部有紀,矢嶋祐也,山田真澄,関 実
    • Organizer
      化学工学会第47回秋季大会
    • Place of Presentation
      北海道大学札幌キャンパス
    • Year and Date
      2015-09-09 – 2015-09-11
  • [Presentation] コラーゲン微粒子を利用した毛細血管包埋ブロックの作製2015

    • Author(s)
      宮崎満理,堀綾香,矢嶋祐也,山田真澄,関 実
    • Organizer
      化学工学会第47回秋季大会
    • Place of Presentation
      北海道大学札幌キャンパス
    • Year and Date
      2015-09-09 – 2015-09-11
  • [Presentation] マイクロフルイディクスを用いた繊維状ECM足場材料の開発2015

    • Author(s)
      矢嶋祐也,堀綾香,榎本紗希子,山田真澄,関 実
    • Organizer
      超高速バイオアセンブラ第4回若手研究者シンポジウム
    • Place of Presentation
      大阪大学豊中キャンパスシグマホール
    • Year and Date
      2015-07-03 – 2015-07-03
  • [Presentation] 多層状パターン化ハイドロゲルの作製と肝組織工学への応用2015

    • Author(s)
      渡部有紀,矢嶋祐也,山田真澄,関 実
    • Organizer
      超高速バイオアセンブラ第4回若手研究者シンポジウム
    • Place of Presentation
      大阪大学豊中キャンパスシグマホール
    • Year and Date
      2015-07-03 – 2015-07-03
  • [Presentation] コラーゲン微粒子スキャホールドを利用した毛細血管包埋ブロックの作製2015

    • Author(s)
      宮崎満理,堀綾香,山田真澄,関 実
    • Organizer
      超高速バイオアセンブラ第4回若手研究者シンポジウム
    • Place of Presentation
      大阪大学豊中キャンパスシグマホール
    • Year and Date
      2015-07-03 – 2015-07-03
  • [Presentation] ヘテロハイドロゲルを利用する肝微小環境の再構成と立体的肝組織の作製2015

    • Author(s)
      矢嶋祐也,山田真澄,関 実
    • Organizer
      第22回HAB研究機構学術年会
    • Place of Presentation
      昭和大学上條講堂
    • Year and Date
      2015-06-26 – 2015-06-27
  • [Presentation] 層状ハイドロゲル形成による血管組織工学アプローチ2015

    • Author(s)
      木下敬太,岩瀬優輝,山腰健太,山田真澄,関 実
    • Organizer
      第22回HAB研究機構学術年会
    • Place of Presentation
      昭和大学上條講堂
    • Year and Date
      2015-06-26 – 2015-06-27
  • [Presentation] Functionalization and Characterization of Vascular Tissue Models Prepared by Using Polymer/Hydrogel Microchannel Structures2015

    • Author(s)
      Keita Kinoshita, Masumi Yamada, Masaki Iwase, Yuya Yajima, and Minoru Seki
    • Organizer
      The 7th International Symposium on Microchemistry and Microsystems (ISMM2015)
    • Place of Presentation
      Kyoto, Japan
    • Year and Date
      2015-06-08 – 2015-06-10
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Production of Anisotropic Hydrogel Materials Using Microfluidics for Tissue Engineering Applications2015

    • Author(s)
      Masumi Yamada and Minoru Seki
    • Organizer
      EMRS 2016 Spring Meeting
    • Place of Presentation
      Lille Grand Palais, Lille, France
    • Year and Date
      2015-05-11 – 2015-05-15
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Remarks] Bioprocess Chemistry and Engineering Lab

    • URL

      http://chem.tf.chiba-u.jp/gacb01/

URL: 

Published: 2017-01-06  

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