2002 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
00J05438
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
島田 緑 大阪大学, 理学研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 減数分裂 / チェックポイント / DNA複製 / 細胞周期 |
Research Abstract |
減数分裂の相同組換えはDNA二重鎖切断(DSB)により開始されるが、減数第一分裂が開始するまでにDSBを修復する必要がある。私は、減数分裂相同組み換え率が低下する分裂酵母のmeu13変異株を用いて、以下の結果を明らかにした。(1)meu13変異株は減数第一分裂への進行が遅延した。(2)meu13変異株の減数第一分裂の遅延は、組換えの開始とcheckpoint rad^+遺伝子、cds1^+,減数分裂特異的なcds1^+ホモログのmek1^+に依存していた。(3)PFGEによる減数分裂特異的なDSBを検出したところ、meu13変異株ではDSBの修復が遅れていた。(4)checkpoint radとmeu13の二重変異株の胞子の生存率と組み換え率はさらに低下した。(5)相同組換え期の細胞にガンマ線照射を行い、多量にDSBを導入したところ、rad17^+に依存して減数第一分裂の開始が遅延した。(6)meu13変異株では減数第一分裂への進行が遅延するのと一致して、Cdc2Tyr15の脱リン酸化も遅延していた。以上のことから、分裂酵母では減数分裂組換え過程で生じるDSBの修復が遅れたときに、減数第一分裂の開始が遅延する制御機構が存在することが分かった。このDSBの修復の遅延は、checkpoint rad^+により感知され、cds1^+,mek1^+にシグナルが伝わり、Cdc2Tyr15の脱リン酸化を維持することで減数第一分裂の開始が遅延すると示唆される。またこの制御機構は、胞子の生存率と組み換え率を高く維持するという生物学的な意義を持つと考えられる。
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[Publications] M.Shimada et al.: "Replication factor C3 of Schizosaccharomyces pombe, a small subunit of replication factor C complex, plays a role in both replication and damage checkpoints"Molecular Biology of the Cell. 10・12. 3991-4003 (1999)
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[Publications] M.Shimada et al.: "The meiotic recombination checkpoint is regulated by checkpoint rad^+ genes in fission yeast"EMBO Journal. 21・11. 2807-2818 (2002)