1991 Fiscal Year Annual Research Report
腎尿細管に於けるカルシウム再吸収の細胞学的機構の解明
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01570368
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Research Institution | Kitasato University |
Principal Investigator |
塚本 雄介 北里大学, 医学部, 講師 (40146345)
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Keywords | Calcium pump / Calcium ATPase / Parathyroid hormone / Calcitriol / Kidney / Proximal tubule / Distal tubule / Basolateral membrane vesicle |
Research Abstract |
1。ビタミンD欠乏ラット(D欠)、副甲状腺摘出ラット(PTX)、甲状腺副甲状腺摘出ラット(TPTX)を用いて腎皮質側底細胞膜Ca pump活性の1,25(OH)_2D_3および副甲状腺ホルモン(PTH)による調節機序を検討した。その結果、(1)D欠では正常に比しCa pump活性のVmaxが低下していたが、1,25(OH)_2D_3投与、またはCa補給による低Ca血症の補正により低下していたVmaxは正常化した。(2)D欠では血清PTH値が増加しており、Ca補給、1,25(OH)_2D_3の両者の補充によりPTHは正常化した。(3)TPTX,PTXいずれでもCa pumpに変化は見られなかった。(4)以上より、D欠ラットにおけるCa pump活性の低下は二次性副甲状腺機能亢進症によるもので、1,25(OH)_2D_3の直接的な効果は証明できなかった。2。腎皮質由来の側底細胞膜は近位尿細管(PT)と遠位尿細管(DT)の混在であることから、両者を分離し、各々のCa pump活性の相違を検討した。その結果、(1)フイコ-ル勾配法によりPT,DTを分離し、各々からBLMVを分離することに成功した。(2)DT由来のCpumpはCa^<2+>に対し極めて高い親和性(Km=42.6nM)をPT由来(Km=75.6nM)に比し有していた。(3)PTXによりDTではCa pump活性 のKmが増加し、PTではそのVmaxが減少した。1,25(OH)_2D_3をPTXラットに投与してもこれらのCa pump活性の変化は修飾されなかった。(3)以上より、PTHはPTではCa pumpのVmaxを刺激し、DTではそのCa^<2+>に対する親和性を刺激することでCa pump活性の調節を行っていることが明らかになった。以前の皮質を用いた研究ではこれらの異なるCa pump活性の混在によりPTHの効果が明らかにならなかったが、二次性副甲状腺機能亢進症という病的に高いPTHがCa pump活性を抑制することも合目的的と考えられる。3。これらCa pumpに対するモノクロ-ナル抗体の作成は2度にわたって試みたがいまだ成功していない。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Yusuke Tsukamoto,Teiichi Tamura,Michiyo Saitoh,et al.: "Depression of calcium pump activity in renal cortex of vitamin Dーdeficient rats with secondary hyperparaーthyroidism." Acta Endocrinologica. 123. 438-444 (1990)
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[Publications] Yusuke Tsukamoto: "The effects of parathyroid hormone(PTH)on Ca Transport." Nephrology,ed.by M.Hatano,SpringerーVerlag. 1509-1516 (1991)
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[Publications] Yusuke Tsukamoto,Kazunobu Sugimura,Wadi N.Suki: "Role of Ca2+/H+ antiporter in the kidney." Kidney International. 40. S-90 S-94 (1991)
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[Publications] Yusuke Tsukamoto,Satoshi Saka,Michiyo Saitoh: "Parathyroid hormone stimulates ATPーdependent calcium pump activity by a different mode in proximal and distal tubules of the rat." Biochimica et Biophysica Acta. 1103. 163-171 (1992)