アミノ酸ラセミ化酵素の活性中心ペプチドの合成とコンフォメ-ション

1990 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01571155
• Research Institution: The University of Tokushima
• Principal Investigator: 武田 美雄 徳島大学, 総合科学部, 教授 (70025716)
• Keywords: アミノ酸 / ラセミ化 / 活性中心 / ペプチド / 合成 / コンフォメ-ション

Research Abstract

バクテリアの細胞壁ペプチドグリカンの重要構成単位であるDーアミノ酸の生合成に際し、重要な働きをするアミノ酸ラセミ化酵素のうちBacillus stearothermophilusのアラニンラセミ化酵素の活性中心オクタペプチドの新、旧のアミノ酸配列、Salmonella typhimurirumの2種のアラニンラセミ化酵素およびPseudomonas striataのアミノ酸ラセミ化酵素の計3種の活性中心テトラデカペプチドの合成を完成させた。既ち、前年度に合成したB.stearoーthermophilus酵素の保護活性中心オクタペプチドをtrimethylsilyltriflateーthioanisole系で保護基を除去し、N末端がアセチル基で保護された目的のオクタペプチド、ACNーAlaーProーProーLysーAlaーAsnーAlaーTyrーOH,およびNAcーAlaーValーValーLysーAlaーAsnーAlaーTyrーOHを得た。また、前年度に合成した合成中間体の保護短鎖ペプチドを用いBocーValーTrp(TPS)ーSer(Bzl)ーValーValーOBzl,BocーValーTrpーSerーValーValーOMe BocーLeuーValーAlaーValーValーOBzl,BocーLeuーThrーAlaーValーLeuーOMeのペンタペプチド類とBocーLys(Z)ーAlaーAsnーAlaーTyr(Bzl)ーGlyーHisーGlyーTleーOBz,BocーLys(Z)ーAlaーAsnーAlaーTyr(Bzl)ーGlyーHisーGlyーLeuーOBzl,BocーLys(Z)ーAlaーAsp(Bzl or CHX)ーAlaーTyr(Bzl)ーGlyーHisーGlyーTleーOBzlのノナペプチド類を合成し、それらをフラグメント縮合しSーtyphimuriumのdadB,dal両アラニンラセミ化酵素の保護テトラデカペプチド、BocーValーTrpーSerーValーValーLys(Z)ーAlaーAsnーAlaーTyr(Bzl)ーGlyーHisーGlyーTleーOBzl〔BocーValーTrp(TPS)ーSer(Bzl)ーValーValーLys(Z)ーAlaーAsnーAlaーTyr(Bzl)ーGlyーHisーGlyーIleーOBzl〕およびBocーLeuーValーAlaーValーValーLys(Z)ーAlaーAsnーAlaーTyr(Bzl)ーGlyーHisーGlyーLeuーOBzlならびにP.striataの保護テトラデカペプチドBocーLeuーThrーAlaーValーLeuーLys(Z)ーAlaーAsp(Bzl or CHX)ーAlaーTyr(Bzl)ーGlyーHisーGlyーIleーOBzlを得た。更にこれらの保護体をN末端をNーアセチル体に変換後、保護基を除去し、N末端がアセチル基で保護された3種のテトラデカペプチドを得た。また、この研究過程で得たペプチドのうち、まず、BocーLeuーThrーAlaーValーLeuーOMe,BocーAlaーProーProーLys(Z)ーAlaーAsnーAlaーTyr(Bzl)ーOBzlについて ^1HーNMRによりそのコンフォメ-ションについて検討を加えた。