2002 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
01J06501
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
柿澤 茂行 東京大学, 大学院・新領域創成科学研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 植物マイコプラズマ / 形質転換 / プラスミド |
Research Abstract |
本研究は、形質転換系の確立していない植物マイコプラズマに対して、世界で始めて当研究室にて発見したRCR型植物マイコプラズマプラスミドを用いてベクターを開発し、植物マイコプラズマの形質転換系確立の技術基盤を構築することを目的としている。 これまでの解析により、植物マイコプラズマのプラスミドに7つのORFが見いだされ、そのうち2つのみが既知の配列と相同性があることがわかっており(複製酵素:Rep、1本鎖DNA結合タンパク質:single-stranded DNA-binding protein)、さらに、複製酵素Repのタンパク質レベルでの発現が確認されたことにより、Repによりプラスミドの複製が行われている可能性が強く示唆されていた。 複製酵素Repと他の微生物プラスミド由来の複製酵素とを比較することで、複製酵素Repの周辺領域に複製起点が存在する可能性が示唆されたが、これについてはさらなる解析による検証が必要である。 また、植物マイコプラズマのプラスミド全長にわたってプロモーター領域の解析を行ったところ、多数のプロモーター候補が認められた。したがってこのプラスミドは様々な領域から転写されているものと推測された。さらに、機能未知であるORF2の下流にヘアピン構造が認められたことから、これがターミネーターとして機能している可能性が示唆された。ORF2は、他の遺伝子とオペロン構造を形成しておらず、単独での転写調節が行われている可能性が考えられた。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Shigeyuki KAKIZAWA et al.: "Cloning and expression analysis of Phytoplasma protein translocation genes"Molecular Plant-Microbe Interactions. Vol.14 No.9. 1043-1050 (2001)
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[Publications] Shigeyuki KAKIZAWA et al.: "Cloning of phytoplasmal membrane protein, its overexpression in E. coli and specific antibody production of the protein"Japanese Journal of Mycoplasmology. No.28. 44-45 (2001)
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[Publications] Kenro OSHIMA et al.: "A plasmid of phytoplasma encodes a unique replication protein having both plasmid-and virus-like domains : clue to viral ancestry or result of virus/plasmid recombination?"Virology. Vol.285. 270-277 (2001)