2002 Fiscal Year Annual Research Report
歯周病細菌の血清型特異多糖抗原を用いた歯周病ワクチンの開発
Project/Area Number |
01J10070
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Research Institution | Kyushu University |
Principal Investigator |
鈴木 奈央 九州大学, 大学院・歯学研究院, 特別研究員(PD)
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Keywords | 歯周病細菌 / Actinobacillus actinomycetemcomitans / 血清型特異多糖抗原 |
Research Abstract |
歯周炎は特定の歯周病細菌によって惹起される感染症であるとの認識が高まりつつある。なかでも、グラム陰性通性嫌気性桿菌Actinobacillus actinomycetemcomitans (Aa)は若年性歯周炎の原因菌として知られている。近年、同菌の菌体表層に局在する多糖抗原(SPA)の病因論的役割が注目されるようになった。 Aa血清型aのSPAは菌体外多糖として非常に稀な6-deoxy-D-talanである。このSPA合成機構を解明することは、同菌の病原性を明らかにする目的のみならず、SPAを用いたAaの歯周病ワクチンの開発のために非常に重要である。我々は血清型aのSPを構成する糖ヌクレオチドGDP-6-deoxy-D-talose合成酵素をコードする遺伝子を見いだし、酵素を発現精製し、HPLCで反応確認後、糖ヌクレオチドを精製した。続いてNMR解析及びGC/MS分析を行ったところ、酵素反応物がGDP-6-deoxy-D-taloseであることが確認され、GDP-6-deoxy-D-talose合成経路が明らかになった(2002, Eur. J. Biochem. 269 : 5963-5971)。 AaはSPAによって6種類の血清型に分類されている。これまでに血清型間に病原性の違いがみられるとの報告がある。既に我々はSPA合成遺伝子より血清型特異プライマーを設計し、PCR法を用いたAaの血清型判定方法を開発した。そこでこの方法を利用し、企業検診にてPorphyromanas gingivalis (Pg)とAaについてスクリーニング調査を実施し、我が国におけるAa感染の実態を明らかにした(Oral Microbiol. Immunol. In press)。 歯周病のリスク判定を行うには、病変部位における歯周病細菌の存在の有無のみならず、細菌数あるいは細菌叢に占める割合を考慮する必要がある。そこで、歯周病細菌PgとAaについて両末端を蛍光ラベルしたTaqManプローブを用い、リアルタイムPCR法による定量法を開発した(2003, J. Clin. Microbiol. 41 : 863-866)。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] N.Suzuki, Y.Nakano, Y.Yoshida, T.Nezu, Y.Terada, Y.Yamashita, T.Koga: "Guanosine diphosphate-4-keto-6-deoxy-D-mannose reductase in the pathway for the synthesis of GDP-6-deoxy-D-talose in Actinobacillus actinomycetemcomitans"Eur. J. Biochem.. 269. 5963-5971 (2002)
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[Publications] A.Yoshida, N.Suzuki, Y.Nakano, T.Oho, M.Kawada, T.Koga: "Development of a 5' fluorogenic nuclease-based real-time PCR assay for quantitative detection of Actinobacillus actinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis"J. Clin. Microbiol.. 41. 863-866 (2003)
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[Publications] Y.Yoshida, N.Suzuki, Y.Nakano, K.Shibuya, Y.Ogawa, T.Koga: "Distribution of Actinobacillus actinomycetemcomitans serotypes and Porphyromonas gingivalis in Japanese adults"Oral Microbiol. Immunol.. (in press).