2003 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
01J11173
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Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
Principal Investigator |
渡辺 洋平 東京工業大学, 資源化学研究所, 特別研究員(PD)
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Keywords | 分子シャペロン / 凝集体 / 脱凝集 / ClpB / DnaK |
Research Abstract |
1、DnaK-ClpBシャペロンシステムにおけるDnaK DnaJ assembly factor(DafA)の役割 高度好熱菌Thermus thermophilusのDnaKはDnaK DnaJ Assembly Factor(DafA)を介して、補助因子であるDnaJとヘテロ複合体(DnaKJ複合体)を形成する。好熱菌菌体内で、DnaKは単独あるいはDhaKJ複合体として存在する。これら2種のDnaK(J)分子の活性や役割の違いを調べた。 DnaK-ClpBシャペロンはDnaK、DnaJがそれぞれ単独で存在している時は、熱凝集させた基質タンパク質を再生することができるが、DnaKJ複合体の状態ではできなかった。さらに、DnaKJ複合体は好熱菌における熱ストレス条件である90℃近くの高温こさらされることでDafAが失活し、DnaKとDnaJに解離した。以上の結果からDafAが熱ストレスに応じてDnaKJの構造、活性を制御する熱ストレスセンサーである可能性が考えられた。 2、ClpBのコイルドコイル構造の役割 海外研究グループとの共同研究として好熱菌ClpBの結晶構造解析を行った。構造解析の結果からClpBは6量体リング構造をとり、長いコイルドコイル構造がリングの外側にはり出していることが明らかになった。このコイルドコイル構造と同一分子内の他のドメインをジスルフィド結合で固定したところDnaK-ClpBシャペロンによる脱凝集活性が失われた。ClpBが脱凝集反応をすすめる上で、コイルドコイル構造が大きく動いていることが示唆された。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] Sukyeong Lee: "The structure of ClpB : A molecular chaperone that rescues proteins from an aggregated state"Cell. 115. 229-240 (2003)
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[Publications] Yo-hei Watanabe: "Trigonal DnaK-DnaJ comples versus free DnaK and DnaJ : Heat stress converts the former to the latter, and only the latter can do disaggnegation cooperation with ClPB"The Journal of Biological Chemistry. 279(in press). (2004)