1990 Fiscal Year Annual Research Report
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02453099
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
砂本 順三 京都大学, 工学部, 教授 (80037811)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 智典 京都大学, 工学部, 助手 (00162454)
秋吉 一成 京都大学, 工学部, 助手 (90201285)
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| Keywords | リポソ-ム / 膜タンパク質 / 膜タンパク再構成リポソ-ム / 赤血球 / 人工ワクチン |
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| Research Abstract |
1.近年のタンパク質化学の目覚ましい進展に伴い、タンパク質群の構造および機能解析は著しく進んだ。しかし、その殆んどは可溶性タンパク質についてであり、細胞膜タンパク質に関しては非常の遅れているのが現状である。本研究では、膜タンパク質をその活性を失う事なく細胞膜よりリポソ-ムに直接再構成する手法について検討した。
2.人工境界脂質(DDPC)の合成法を確立し、その境界脂質としての機能を、DSC,ESR,ケイ光偏光解消法および重水素NMR法により明らかとした。
3.種々のDDPC含有DMPCおよび卵黄レシチンリポソ-ムとヒト赤血球とを相互作用させ、細胞からリポソ-ム側へ転移してくる膜タンパク質量とリポソ-ム組成との相関を調べた。その結果、DDPCを添加することにより、タンパク質の転移効率が有意に増大することが明らかとなった。その際、赤血球膜中の膜酵素の一種であるアセチルコリンエステラ-ゼが、その活性を90%以上保持したまま、リポソ-ムに再構成されることも明らかとなった。
4.癌細胞(放射線誘導癌細胞・Balb RVD)から抗原提示タンパク質を直接リポソ-ムに移行、再構させリポソ-ムワクチン作成し、マウスを使った実験で高い抗腫瘍効果の発現に成功した。この手法は、従来法と比較して抗原性タンパク質の化学的変性も起こらず、より高い免疫能が得られることも実証しており、新しいワクチン調製法として今後おおいに展開が予想される。
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[Publications] J.Sunamoto: "Effective Transfer of Membrane Proteins from Human Erythrocytes to Artificial Boundary Lipid Containing Liposomes" Chem.Lett.1990. 1249-1252 (1990)
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[Publications] J.Sunamoto: "Sythesis and Characterization of 1,2ーDimyrixtoylamidoー1, 2ーdeoxyphosphatidylcholine as a Boundary Lipid Model." Biochim.Biophys.Acta. 1024. 209-219 (1990)
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[Publications] J.Sunamoto: "Direct Transter of Tumor Surface AntigenーPresenting Protain(TSAP) from Tumor Cell to Liposome for Making Liposomal Vaccine" J.Controlled Release.
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[Publications] J.Sunamoto: "Effective Transfer of Membrane Proteins from Intact Cells to Liposomes and Preparation of Liposomal Vaccines" Proceeding of the 10th Enzyrme Engineering Conference.
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[Publications] R.Shibata: "Induction of in vitro and in vivo AntiーTumor Responses by Sensitization of Mice with Liposomes Containing a Crude Butanol Extract of Leukemia Cells and Transferred Intermembranously with Cell Surface Protains" Int.J.Cancer.
