1990 Fiscal Year Annual Research Report
先天性免疫不全症におけるリンパ系幹細胞への欠損遺伝子の導入
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02670433
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
宮川 幸昭 信州大学, 医学部・附属病院・小児科, 講師 (80020931)
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| Keywords | 先天性免疫不全 / B細胞欠損型CVID / 磁力線培養法 / stromal cell / 養子移入療法 / TGFーβ1 / GーCSF / 繊維芽細胞増殖因子 |
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| Research Abstract |
先天性免疫不全症のうち、common variable immunodeficiency(CVID)についてのリンパ系幹細胞の培養法を確立した。方法は骨髄有核細胞をpercoll比重遠沈法で40%以上をstromal cell源とし60%層を幹細胞源した。(日本免疫學会抄録)。stromal cellの培養法は1.800ガウスの磁力線培養装置を使用して繊維芽細胞増殖因子、GーCSF GFーβ1の存在を基本に培養した。対照群として胎児骨髄細胞を使用した場合は,ILー1誘導stromal cell上には、前T細胞を主体としたリンパ系幹細胞が培養された。一方、ILー7誘導胎児stromal cell上には前B細胞を主体にしたリンパ系幹細胞が培養されてきた。他方、成人型stromal cellは極めてILー7に良く反応し前B細胞育成能を保有するstromal cellが誘導されてきた。
先天性免疫不全症においては、B細胞欠損型CVIDにおいて上記の方法を使用してCVIDーstromal cellを誘導したところ、ILー1反応性stromal cellが誘導されたのみでILー7反応性strmal cellは誘導されてこなかった。しかも、CVIDのstromal cellのリンパ系幹細胞の育成能は、前T細胞を主体としたT細胞系のみで前B細胞及びB細胞の育成能はまったく証明されなかった。
以上の結果より、CVIDのstromal cellは胎児型stromal cellであり、B細胞欠損型のCVIDは恐らくILー7反応性stromal cellの欠損により、B細胞系の欠落が引き起こされたと思われる。現在リンパ系幹細胞はmonoclonal抗体を使用した成績からCD34陽性、CD33陰性の多岐能分裂能を保有する幹細胞からTdT陽性,CD38陽性のリンパ系幹細胞に分化し、更にCD10、CD19、HLA DR陽性のB細胞系とCD5,CD7,CD2陽性のT細胞系に分化することが判明した。B細胞欠損型CVIDの骨髄細胞をin vitroで培養してCVIDの患児に養子移入すべき大量培養法を現在開発中である。
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[Publications] 宮川 幸昭: "臨床応用遺伝学ー原発性免疫不全症における遺伝子診断および治療法の最近の進歩" 37. 563-575 (1990)
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[Publications] Komiyama Atsushi,Miyagawa Yukiaki,et al.: "Natural killer cell immunodeficiency in siblings:Defective killing in the absence of natural killer cytotoxic factor activity in natural killer and lymphokineーactivated killer cytotoxicities." Pediatrics. 85. 323-330 (1990)
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[Publications] Agematsu Kazunaga,Miyagawa Yukiaki,et al.: "Detection of engraftment and chierism after bone marrow transplantation by in situ hybridization using a Yーchromosome specific probe." Am.J.Hematol.33. 255-260 (1990)
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[Publications] Miyagawa Yukiaki,et al.: "Comparison of fetal and adult type stromal cells:Fetal type stromal cell is suitable for T lineage cell growth and adult type stromal cell for preーB cell growth by a magnetic culture system." J.Immunol.
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[Publications] Miyagawa Yukiaki,et al.: "Comparison of huamn fetal and sdult lymphopoiesis:Clonal growth of lymphoid progenitors on cytokineーinduced stromal cells in a magnetic culture system." J.Exp.Med.
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[Publications] Miyagawa Yukiaki,et al.: "Abnormality of bone marrow derived stromal cells as a cause of B cellーdefect type common variable immunodeficiency(CVID)." J.Clin.Invest.
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[Publications] 宮川 幸昭 小林 登(編): "インタ-ロイキンとその臨床的応用 新小児科学大系 年刊版 小児医学の進歩 89B" 中山書店ー東京, 20 (1989)
