2003 Fiscal Year Annual Research Report

植物の塩および酸化ストレスに関与する膜輸送系の分子解析

Research Project

Project/Area Number	02F00677
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	魚住信之名古屋大学, 生物機能開発利用研究センター, 助教授
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	WIDYASTUTI Sri 名古屋大学, 生物機能開発利用研究センター, 外国人特別研究員
Keywords	カリウム / K^+チャネル / シロイヌナズナ / 酵母 / GFP / タバコ / 輸送体 / 膜
Research Abstract	植物シロイヌナズナのK^+チャネルのKAT1とAKT2の両者はともに6回の膜貫通構造を有しており、その膜貫通構造を形成する領域のアミノ酸配列は似ている。KAT1はK^+を内向きに(取り込む方向)のみ透過する輸送体であるが、AKT2はK^+を内と外の両向きに透過する輸送体である。ところがKAT1は酵母の原形質膜のK^+輸送体の変異を相補し、AKT2は相補しない。このことからKAT1は原形質膜、AKT2は細胞内小器官の膜に発現していると考えられる。しかし、その細胞内局在性が分かっていない。本研究では、KAT1とAKT2の細胞内局在性を明らかにするために、酵母にGFP融合蛋白質を発現させて顕微鏡観察を行う。昨年度作成したKAT1とAKT2のキメラ蛋白質にGFPを融合した蛋白質を酵母で発現するために、酵母発現用ベクターに本遺伝子を挿入し、酵母に導入したところ、シグナルが細胞内の一部にシグナルの固まりが観察された。細胞膜からのシグナルも観察されたが、有意に局在性を示していないことから、明確な結果は得られなかった。同様にタバコ培養細胞においても明確な結果は得られなかった。一方、植物シロイヌナズナのK^+チャネルのKCO2についても同様の観察を行った。KCO2をAgrobacteriumによる形質転換により植物シロイヌナズナで発現させ顕微鏡観察したが結論は出なかった。現在、植物培養細胞を用いて一過的発現を検討している。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] 佐藤陽子, 水谷昭文, 魚住信之: "K^+イオン輸送系の植物成長と塩感受性への役割"蛋白質核酸酵素増刊号共立出版. 48・15. 2052-2060 (2003)
[Publications] Berthomieu, P., et al.: "Functional analysis of AtHKT1 in Arabidopsis shows that Na^+ recirculation by the phloem is crucial for salt tolerance."EMBO J.. 22. 2004-2014 (2003)
[Publications] Kato Y., Hazama A., Yamagami M., Uozumi N.: "Addition of a peptide tag at the C terminus of AtHKT1 inhibits its Na^+ transport."Biosci.Biotech.Biochem.. 67. 2291-2293 (2003)
[Publications] Umigai, N., et al.: "Topogenesis of two transmembrane type K^+ channels, Kir2.1 and KcsA."J.Biol.Chem.. 278. 40373-40384 (2003)
[Publications] Zhang, L., Lee, J-K., John, S.A., Uozumi, N., Kadama, I.: "Mechanosensitivity of GIRK channels is mediated by PKC-dependent channel-PIP_2 interaction."J.Biol.Chem.. In press. (2004)
[Publications] 水谷昭文, 佐藤陽子, 松田信行, 加藤靖浩, 魚住信之: "植物カリウムイオン輸送系と生理的役割"植物細胞工学別冊秀潤社. 18. 40-47 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

植物の塩および酸化ストレスに関与する膜輸送系の分子解析

Principal Investigator

魚住 信之 名古屋大学, 生物機能開発利用研究センター, 助教授

Research Products

[Publications] 佐藤陽子, 水谷昭文, 魚住信之: "K^+イオン輸送系の植物成長と塩感受性への役割"蛋白質核酸酵素増刊号 共立出版. 48・15. 2052-2060 (2003)

[Publications] Berthomieu, P., et al.: "Functional analysis of AtHKT1 in Arabidopsis shows that Na^+ recirculation by the phloem is crucial for salt tolerance."EMBO J.. 22. 2004-2014 (2003)

[Publications] Kato Y., Hazama A., Yamagami M., Uozumi N.: "Addition of a peptide tag at the C terminus of AtHKT1 inhibits its Na^+ transport."Biosci.Biotech.Biochem.. 67. 2291-2293 (2003)

[Publications] Umigai, N., et al.: "Topogenesis of two transmembrane type K^+ channels, Kir2.1 and KcsA."J.Biol.Chem.. 278. 40373-40384 (2003)

[Publications] Zhang, L., Lee, J-K., John, S.A., Uozumi, N., Kadama, I.: "Mechanosensitivity of GIRK channels is mediated by PKC-dependent channel-PIP_2 interaction."J.Biol.Chem.. In press. (2004)

[Publications] 水谷昭文, 佐藤陽子, 松田信行, 加藤靖浩, 魚住信之: "植物カリウムイオン輸送系と生理的役割"植物細胞工学別冊 秀潤社. 18. 40-47 (2003)

魚住信之名古屋大学, 生物機能開発利用研究センター, 助教授

[Publications] 佐藤陽子, 水谷昭文, 魚住信之: "K^+イオン輸送系の植物成長と塩感受性への役割"蛋白質核酸酵素増刊号共立出版. 48・15. 2052-2060 (2003)

[Publications] 水谷昭文, 佐藤陽子, 松田信行, 加藤靖浩, 魚住信之: "植物カリウムイオン輸送系と生理的役割"植物細胞工学別冊秀潤社. 18. 40-47 (2003)