2002 Fiscal Year Annual Research Report
神経変性疾患の原因遺伝子aprataxinの生理機能の解析
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02J03930
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Research Institution | Niigata University |
Principal Investigator |
伊達 英俊 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 神経変性疾患 / アプラタキシン |
Research Abstract |
APTXのmRNA2種の発現量 Aprataxin(APTX)には343アミノ酸のLong form APTXと169アミノ酸からなるShort form APTXが存在する。これら2種のAPTX mRNAの発現量を臓器別(脳・肝臓・心臓・腎臓・肺・気管)で解析を行ったところ、すべての臓器でLong from APTXが多いことが分かった。 Long form APTXは核移行シグナルを持つ 野生型Long form APTXは核に局在し、Short form APTXは細胞質に存在する。 Long form APTXのアミノ酸配列には核移行シグナル(NLS)と思われる配列が3種存在する。これらのNLSよりN末側を削り、NLSを開始コドンに置き換えた短いコンストラクトを3種作成し、細胞局在を検討したところ、もっともN末側にあるNLS(NLS1)を削ったコンストラクトが核に局在しなかったことより、NLS1が核移行シグナルと考えられた。 APTXペプチド抗体の作成 APTXのC末側を認識するペプチド抗体(ME41 ME44)を作成した。この抗体を用いて、発症者リンパ球のタンパク質をウエスタンブロッティングし、健常者と比較したところ、発症者はバンドが確認できないか、薄いバンドが見られた。 APTXノックアウトマウスの作成 アプラタキシン(APTX)のノックアウトマウスを作成した。このマウスでは、現在キメラマウス4個体が獲られており、germinal transmissionを試みている。APTXノックアウトキメラマウスでは特に今のところ表現型はない。今後ホモ接合体個体を用い解析する。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Shimazaki H et al.: "Early-onset ataxia with ocular motor apraxia and hypoalbuminemia : the aprataxin gene mutations"Neurology. 59(4). 590-595 (2002)
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[Publications] Arai A et al.: "A novel mutation in the GNE gene and a linkage disequilibrium in Japanese pedigrees"Annals of Neurology. 52(4). 516-519 (2002)
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[Publications] 伊達英俊 他: "常染色体劣性遺伝性脊髄小脳変性症(アプラタキシン欠損症)"ゲノム医学. 2(3). 241-250 (2002)
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[Publications] 伊達英俊 他: "眼球運動失行と低アルブミン血症を伴う早発型脊髄小脳失調症の分子遺伝学"神経内科. 57(2). 113-118 (2002)
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[Publications] 横関明男 他: "眼球運動失行と低アルブミン血症を伴う早発型脊髄小脳失調症の臨床"神経内科. 57(2). 108-112 (2002)