2002 Fiscal Year Annual Research Report
輸送因子Mex67p/Mtr2p複合体を用いたmRNA輸送機構の解明
Project/Area Number |
02J05128
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
才脇 卓也 大阪大学, 医学系研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 細胞核 / 核-細胞質間輸送 / メッセンジャーRNA |
Research Abstract |
転写されたmRNAは細胞内受容体と複合体を形成することにより核から細胞質に輸送されるが、この輸送過程には従来から知られている細胞内受容体importin-β様蛋白質や低分子量GTPase Ranが直接関与しないことからimportin-β-Ranシステムとは異なる因子群が独自の機構で作用していることが考えられている。 Mex67p/Mtr2p複合体は、合成致死スクリーニング法を用い、mRNA輸送に関与するヌクレオポリンNup85pとの相互作用に基づいて同定された酵母の蛋白質複合体である。Mex67p/Mtr2p複合体はヌクレオポリンに結合すること、積み荷であるmRNAと相互作用することやそれぞれの温度感受性変異株においてmRNA輸送障害が認められていることから、Mex67p/Mtr2p複合体はmRNA輸送における非importin-β型の細胞内受容体であると考えられる。 本年度はMex67p/Mtr2p複合体と上述のヌクレオポリン間の相互作用を、表面プラズモン共鳴を応用した機器BIACOREによる解析をおこなった。具体的には、GST融合蛋白質として大腸菌で発現・精製したヌクレオポリンを抗GST抗体を固定化したセンサーチップ上に結合させ、さらに大腸菌で発現・精製したMex67p/Mtr2p複合体を添加して結合定数を測定した。しかし、この解析からMex67p/Mtr2p複合体の核膜孔通過における方向性に影響を及ぼすほどの顕著な親和性の差は認められなかった。このことからMex67p/Mtr2p複合体の方向性を規定し核膜孔を通過させる因子の存在が示唆された。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Miyamoto Y, Hieda M, Harreman MT, Fukumoto M, Saiwaki T, Hodel AE, Corbett AH, Yoneda Y.: "Importin alpha can migrate into the nucleus in an importin beta-and Ran-independent manner"EMBO J.. 21(21). 5833 (2002)
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[Publications] Fukuyama R, Nakayama A, Nakase T, Toba H, Mukainaka T, Sakaguchi H, Saiwaki T, Sakurai H, Wada M, Fushiki S.: "A newly established neuronal rho-0 cell line highly susceptible to oxidative stress accumulates iron and other metals. Relevance to the origin of metal ion deposits in brains with neurodegenerative disorders"J Biol Chem.. 277(44). 41455 (2002)
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[Publications] Katahira J, Straesser K, Saiwaki T, Yoneda Y, Hurt E.: "Complex formation between Tap and p15 affects binding to FG-repeat nucleoporinsand nucleocytoplasmic shutting"J Biol Chem.. 277(11). 9242 (2002)