2003 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
02J07118
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
田村 克 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 特別研究員(PD)
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Keywords | ノーウォーク様ウイルス / ヘパラン硫酸 / グリコサミノグリカン / 中空粒子 / 胃腸炎 / ヒストンH1 / ウイルス感染防御 |
Research Abstract |
(1)ノーウォーク様ウイルス(NLV)と細胞表面分子との相互作用に関する研究 NLVの細胞表面分子としてヘパラン硫酸を同定した後、さらにrUEVの結合部位を特定するために、グリコサミノグリカン特有のSO_3基添加を阻害するChlorateを用いて結合実験を行った。その結果、rUEVがヘパラン硫酸のSO_3基に結合することが示された(以前、同定した105kDaタンパク質はヘパラン硫酸とは異なる分子であることが追加実験で明らかになった)。 NLVは2つのGenogroup(GIとGII)に分類されるため、結合の比較を行った。GIから2株(rSEV, rFUV))、GIIから2株(rUEV, rCHV)を実験に用いた結果、Intestine407細胞、CHO細胞、および未分化のCaco-2細胞(U-Caco-2)に対し、GIの2株はヘパラン硫酸に結合したが、GIIの2株は全く結合しなかった。また、分化したCaco-2細胞(D-Caco-2)に対してはGIの2株とGIIの2株ともに同程度結合を示し、rUEV(GII)を用いて調べたところ、結合の50%はヘパラン硫酸、残りの50%はH-type血液型抗原に結合していることが示された。 以上の結果から、ヘパラン硫酸に結合できないGIIに対して、GIはヘパラン硫酸とH-type血液型抗原の両方に結合する部位を持っていることが示された。 (2)ウイルス結合分子の感染防御への利用 ^<35>S-rUEVとVOPBA法でrUEVの結合分子として同定されたヒストンH1とをインキュベートし、Intestine407細胞に添加したところ、^<35>S-rUEVの細胞への吸着が著しく減少した。この吸着阻害効果は、ヒストンH1がrUEV粒子に直接結合するばかりでなく、細胞表面にも作用することで引き起こされていた。これは予想外ではあるが、ヒストンが細胞表面のヘパラン硫酸をブロックしていると理解できる。この阻害効果は、HeLa細胞やCHO細胞を用いた時も同様に観察された。しかしPoliovirusに対しては全く阻害効果を示さなかった。以上の結果は、一般にウイルスの結合分子が直接ウイルス粒子を取り囲むことでウイルス感染を阻害できる可能性を示唆している。「網羅的にウイルス結合分子を探索する」手法を導入すれば、まだ培養系が確立されていないウイルスや、新規に発見されるウイルスに対してでも、即座に感染防御分子が見つかることが期待される。
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Research Products
(1 results)
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[Publications] M.Tamura, K.Hatori, M.Kobayashi, T.Miyamura, N.Takeda: "Inhibition of attachment of virions of Norwalk virus to mammalian cells by soluble histone molecules."Archives of Virology. 148. 1659-1670 (2003)