2003 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
02J08327
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
藤幸 知子 東京大学, 大学院・理学系研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | ミツバチ / 攻撃行動 / 遺伝子発現 / ウイルス感染 / マイクロアレイ / Kakugoウイルス |
Research Abstract |
(1)Kakugoウイルスの粒子形成に関する解析 私は、攻撃性の高いミツバチの脳に特異的に検出される新規RNA, Kakugo(Agg-2)を同定し、解析する過程で、Kakugoは新規な昆虫ピコルナ様ウイルスのゲノムであることが示唆してきた。昨年度までには、このRNAについては全長クローニングが完了していると共に、感染性を有することが示唆された。しかし,Kakugo RNAが実際にウイルス粒子を形成するのか否かは不明だった。そこで、その点を検討するため、Kakugo RNAの検出されるミツバチの細胞粗抽出液をショ糖密度勾配遠心法によって10の画分に分画し、各画分におけるKakugo RNA量を定量的RT-PCR法で定量した。その結果、Kakugo RNAの検出される画分が3つ検出された。そのうちの一つは、同時に行ったポリオウイルス粒子の画分と一致した。もう一つは、この細胞粗抽出液から調整したTotal RNAを用いて行った結果と一致した。もう一つは、一番底の画分であった。これらの結果から、細胞内のKakugo RNAは沈降係数の異なる2つの形態で存在し、一つはウイルス粒子内のゲノムRNAとして、もう一つはゲノムRNA由来の遊離したmRNAとして存在することが強く示唆される。底の画分については破砕しきれなかった細胞や、粒子の凝集体由来のRNAを検出したものと考えられる。以上の結果から、Kakugo RNAは細胞内でウイルス粒子を形成することが強く示唆された。 (2)Kakugoウイルスの感染源に関する解析 Kakugoウイルスがミツバチに感染する経路として、ミツバチの巣に寄生するダニからの感染が一つの可能性として考えられた。そこで、ミツバチの巣からミツバチヘギイタダニを採集し、RT-PCR法によつてKakugo RNAが検出されるか否かを検討した。ミツバチヘギイタダニにおいても、Kakugo RNAが検出された。したがって、Kakugoウイルスの感染源としてこのダニが一因である可能性が支持された。
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Research Products
(1 results)
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[Publications] Fujiyuki T, Takeuchi H, Ono M, Ohka S, Sasaki T, Nomoto A, Kubo T: "Novel insect picorna-like virus identified in the brains of aggressive worker honeybees"Journal of Virology. 78(3). 1093-1110 (2004)