2003 Fiscal Year Annual Research Report
神経発生制御因子Zicの蛋白質間相互作用による機能調節機構の解明
Project/Area Number |
02J08651
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
小川 実幸 東京大学, 大学院・医学系研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 発生 / 神経 / Zic |
Research Abstract |
神経発生制御因子Zicファミリーは、神経分化の最初期因子として働くこと、またヒトの先天奇形の原因遺伝子でもあることなど、脊椎動物の形態形成に重要な遺伝子であることはすでに明らかになっている。しかしZic遺伝子の具体的な分子発生制御機構は未だ明らかにされていない。そこで本研究では、Zic2のN末をbaitにして、yeast two hybrid法を行い、Zicと相互作用する分子を探索、同定し、その機能解析を行うことにより、Zicがどのようなシグナルによって発現制御を受けるか等の、Zicの発生制御機構を解明することを目的としている。 今年度は、前年度にZicと相互作用することを確認し、クローニングを行った、新規の遺伝子とZicとの蛋白質間結合の調節機構について解析を行った。 Zic蛋白質の標的配列を持ったレポータープラスミドを用いて、ルシフェラーゼを指標にしたレポーターアッセイの解析により、この新規遺伝子がZicの転写活性にどのような影響を与えるか検討した。その結果、Zicの転写活性が、この新規遺伝子によって抑制的に制御されていることを明らかにした。また、Zic蛋白質との結合ドメインを欠く新規蛋白質の変異体を作製し、それがzicの転写活性に与える影響も解析したところ、結合ドメインを欠く新規蛋白質では、Zicの転写活性を抑制しなかった。これにより、この新規蛋白質がZicと相互作用することにより、Zicの転写活性を抑制的に制御していることが明らかになった。また、この新規遺伝子の特異的抗体を作成し、新規蛋白質の細胞内での局在とマウス組織内での局在を確認した。これにより、新規蛋白質がZicの転写活性を抑制している可能性のある時期、場所が明らかになった。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Takanosu M, Amasaki H, Iwama Y, Ogawa M, Hibi S, Suzuki K: "Epithelial cell proliferation and apoptosis in the developing murine palatal rugae"Anat Histol Embryol.. 31(1). 9-14 (2002)
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[Publications] Amasaki H, Ogawa M, Nagasao J, Mutoh K, Ichihara N, Asari M: "Distribution of apoptotic cells and apoptosis-related molecules in the developing murine palatine rugae"J.Vet.Med.Sci.. 64(12). 1103-1106 (2002)
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[Publications] Amasaki H, Ogawa M, Nagasao J, Mutoh K, Ichihara N, Asari M, Shiota K: "Distributional changes of BrdU, PCNA, E2F1 and PAL31 molecules in developing murine palatal rugae"Ann Anat.. 185(6). 517-523 (2003)
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[Publications] Amasaki H, Arai R, Ogawa M, Takemura N, Yamagami T, Nagasao J, Mutoh K, Ichihara N, Asari M: "Postnatal development of the mouse volatile papilla taste bud cells"J.Vet.Med.Sci.. 65(4). 541-543 (2003)