2002 Fiscal Year Annual Research Report
アルツハイマー病連関神経細胞死に拮抗する新規遺伝子の解析と類縁体の探索
Project/Area Number |
02J09810
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Research Institution | Keio University |
Principal Investigator |
田島 裕久 慶應義塾大学, 医学研究科, 特別研究員(PD)
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Keywords | 神経変性疾患 / アルツハイマー病 / ヒューマニン / 細胞死 / 健忘 |
Research Abstract |
1)モノクローナル抗体の作製 ヒューマニン(HN)ペプチドのN端領域を抗原としてモノクローナル抗体を作製した。しかしながら元来抗原性の低い領域であるため、抗体価の低い抗体しか作製できなかった。また、新規の抗原部位を持つ抗体を作るため、新しくHNペプチド、S14G-HN(HNG)ペプチドに対するポリクローナル抗体も作製した。 2)HNのマウス組織における局在の検討。 HNペプチドの組織分布を明らかにするため、作製したモノクローナル抗体を用いてウェスタンブロッティング法を行った。その結果、HN抗原特異的なバンドが得られた。 3)HN cDNA全長の特定 HNのORF配列に対するantisenseオリゴプローブを用い、ヒトのpoly A+を含むcDNAライブラリーより、プラークハイブリダイゼーション法によりHN cDNAを単離した。また、oligo dT配列をプライマーに用い、3'-RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)法にて全長cDNAのクローニングを試み、polyA+配列を含むHN cDNAを単離した。現在、5'-領域の解析を行なっている。 4)in vivoにおけるHN及びHNGの作用 アルツハイマー病の根治的治療の第一歩として、scopolamine健忘及びβ-アミロイド(Aβ)健忘のマウスモデルに対するHNGの作用の検討を行った。Y maze testを用いた解析よりscopolamine健忘を起こしたマウスはHNGの大脳側脳室への注入により健忘が改善することが明らかとなった。また、HNGのin vivoでの健忘改善効果はチロシンキナーゼインヒビターgenisteinにより阻害されることから、HNGはin vivoでチロシンキナーゼを介して健忘改善を行なっていることが明らかとなった。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Niikura T. et al.: "A tripartite motif protein, binds and destabilizes Humanin, a neuroprotective peptide against Alzheimer's disease-relevant insults"European Journal of Neuroscience. (in press). (2003)
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[Publications] Tajima H. et al.: "Evidence for in vivo production of Humanin peptide, a neuroprotective factor against Alzheimer's disease related insults"Neuroscience Letters. 324. 227-231 (2002)
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[Publications] Kawasumi M. et al.: "Molecular mechanisms for neuronal cell death by Alzheimer's amyloid precursor protein relevant insults"Neurosignals. 11. 236-250 (2002)
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[Publications] Niikura T. et al.: "Death and survival of neuronal cells exposed to Alzheimer's insults"Journal of Neuroscience Research. 70. 380-391 (2002)
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[Publications] Hashimoto Y. et al.: "A rescue factor abolishing neuronal cell death by a wide spectrum of familial Alzheimer's disease genes and Aβ"Proceedings of the National Academy of Sciences of the United of States of America. 98. 6336-6341 (2001)