2002 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
02J11358
|
Research Institution | Kagoshima University |
Principal Investigator |
河野 智哉 鹿児島大学, 大学院・連合農学研究科, 特別研究員(DC2)
|
Keywords | EST解析 / CARD / BPI / LBP / CC-chemokine |
Research Abstract |
EST解析によって魚類より新規の分離となったCARDおよびBPI/LBP遺伝子について、全長、他の脊椎動物との相同性およびドメインの解析を行い、さらに各臓器での発現を解析した。その結果、CARD遺伝子は535残基のアミノ酸より構成されていること、さらに多くのCARDファミリーが持つCARDおよびcoiled-coilドメインを保存していることが確認された。また、哺乳類のCARD9に最も構造が類似していることが確認された。発現解析では、通常状態の頭腎、脾臓、肝臓、心臓および脳で発現していること、さらにコルチゾール処理後、全ての臓器において発現量が上昇することが確認された。 BPI/LBP遺伝子については、473残基のアミノ酸より構成されており、相同性およびドメイン解析より、他の脊椎動物のBPI/LBPと同様に、シグナルペプチドおよびLPS結合ドメインを保存していることが確認された。発現解析では、通常状態の頭腎、肝臓、脾臓、腸、鯉、心臓および脳で発現していること、さらにLPSで経時的に刺激した頭腎と肝臓での発現は、共に刺激後早い段階で上昇し、その後は徐々に減少することが確認された。 これまでに分離された生体防御関連遺伝子のうち、特に初期免疫応答に重要な役割を果たすCC-chemokine遺伝子について、発現ベクターを用いたDNA接種法によって、発現および機能の解析を行った。CC-chemokine遺伝子を導入した魚類の各臓器および血清中での発現は、CC-chemokine遺伝子を導入した魚類はコントロールに比べ有意な上昇が確認された。また、主要な働きとして知られる白血球の遊走能においても、CC-chemokine遺伝子を導入した魚類において、コントロールと比べ有意な活性化が確認された。さらに、貪食能、活性酸素産生量といった非特異免疫応答の活性化も同様に確認された。
|
Research Products
(8 results)
-
[Publications] Tomoya Kono, Kazuyoshi Okamoto, Masahiro Sakai: "Analysis of expressed sequence tags from a yellowtail Seriola quinqueradiata head kidney cDNA library"Aquaculture Research. 33. 1-7 (2002)
-
[Publications] Tomoya Kono, Hironobu Watanuki, Masahiro Sakai: "The activation of interleukin-1β in serum of carp, Cyprinus carpio, injected with peptidoglycan"Aquaculture. 212. 1-10 (2002)
-
[Publications] Tomoya Kono, Kazuhiro Fujiki, Miki Nakao, Tomoki Yano, Makoto Endo, Masahiro Sakai: "The immune responses of carp, Cyprinus carpio, infected with carp interleukin-1β gene"The Journal of Interferon and Cytokine Research. 22. 413-419 (2002)
-
[Publications] Tomoya Kono, Tsuyoshi Ooyama, Shin-Chu Chen, Masahiro Sakai: "Sequencing of 16S-23S rRNA internal transcribed spacer and their application in the identification of Nocardia seriolae by PCR"Aquaculture Research. 33. 1195-1197 (2002)
-
[Publications] Tomoya Kono, Riichi Kusuda, Eijiro Kawahara, Masahiro Sakai: "The phagocytic activity of leucocyte in Japanese flounder, Paralichthys olivaceus, by chemokine gene injection using expression vector"Fisheries Science. 68. 1229-1230 (2002)
-
[Publications] Tomoya Kono, Riichi Kusuda, Eijiro Kawahara, Masahiro Sakai: "The analysis of immune responses of a novel CC-chemokine gene from Japanese flounder Paralichthys olivaceus"Vaccine. 21. 446-457 (2003)
-
[Publications] Ram Savan, Tomoya Kono, Azumi Aman, Masahiro Sakai: "Isolation of a novel CXC chemokine in common carp (Cyprinus carpio L. )"Molecular Immunology. (in press). (2003)
-
[Publications] Tomoya Kono, Tadashi Sakai, Masahiro Sakai: "Molecular cloning of a novel caspase recruitment domain protein (CARD) in common carp Cyprinus carpio L."Gene. (in press). (2003)