2003 Fiscal Year Annual Research Report
C型肝炎ウイルスCoreタンパク質による細胞性遺伝子発現制御機構の解析
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02J61434
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
渡士 幸一 京都大学, ウイルス研究所, 助手
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Keywords | C型肝炎ウイルス / coreタンパク質 / 転写コファクター / レチノイン酸受容体 / Sp110b |
Research Abstract |
本研究において、C型肝炎ウイルスCoreタンパク質(Core)による細胞性遺伝子発現制御機構を明らかにする研究を行った。今回、特にCoreによるレチノイン酸受容体(RAR)の転写活性化の分子機構についての研究を行った。まず、Coreのアミノ末端領域をベイトとして、この領域に結合する細胞性因子を酵母ツーハイブリッド法によりスクリーニングした。その結果、結合候補分子としてSp110bを同定した。Sp110bの分子機能はこれまで全く明らかになっていないので、まずSp110bの分子機能の解析を行った。Sp110bを細胞内に過剰発現させるとRARα活性が減少すること、および細胞内の内在性Sp110bをノックダウンすることによりRARα活性が上昇することより、Sp110bはRARα活性に抑制的に働くことが示唆された。またRARαのリガンド存在下でSp110bとRARαが相互作用すること、Sp110bがRARα結合配列をもつプロモーターに会合することより、Sp110bはRARαの転写コファクターであることが明らかとなった。また、培養細胞において内在性および外来的に発現させたSp110bは主に核に局在することが観察された。しかしながらCoreを発現させることにより、Sp110bは主に細胞質へと局在が変化すること、この局在の変化はCoreとSp110bとの相互作用を介していることが示唆された。このCoreによるSp110bの局在変化を阻害した時、CoreによるRARα活性化能は減弱することがレポーターアッセイ法により示されたことより、CoreはSp110bの局在変化を介してRARα転写活性化を引き起こすことが明らかとなった。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Koichi Watashi et al.: "Modulation of Retinoid Signaling by a Cytoplasmic Viral Protein via Sequestration of sp110b, a Potent Transcriptional Corepressor of Retinoic Acid Receptor, from the Nucleus"Molecular and Cellular Biology. 23・21. 7498-7509 (2003)
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[Publications] Koichi Watashi et al.: "Cyclosporin A Suppresses Replication of Hepatitis C Virus Genome in cultured Hepatocytes"Hepatology. 38・5. 1282-1288 (2003)
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[Publications] Koichi Watashi et al.: "The roles of hepatitis C virus proteins in modulation of cellular functions : A novel action mechanism of the HCV core protein on gene regulation by nuclear hormone receptors"Cancer Science. 94・11. 937-943 (2003)