2003 Fiscal Year Annual Research Report
担子菌コプライナスの減数第一分裂前期に機能するDNA複製関連蛋白質群の解析
Project/Area Number |
03J01278
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Research Institution | Tokyo University of Science |
Research Fellow |
行川 賢 東京理科大学, 理工学部応用生物科学科, 特別研究員(DC2)
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Keywords | 減数第一分裂前期 / コプライナス / DNA ligase I / DNA polymerase α / DNA ligase IV / Flap-endnuclease 1 / LIM15 / DMC1 / RNA interference |
Research Abstract |
1.減数第一分裂前期におけるDNA複製関連蛋白質群の発現 コプライナスDNA ligase I(CoLIG1)は減数第一分裂前期にmRNAの発現が増大し、この時期に機能することが考えられた。また、CcLIG1はこの時期にCcPCNAと相互作用することがin vivo免疫沈降法により確認されたため、CcLIG1とPCNAの共役した機構が前期に存在することが示唆された(Namekawa et al.BBA 2003)。コプライナスDNA polymerase α複合体についても減数第一分裂前期にmRNAの発現が増大していた。さらに、減数分裂期を通じてDNA polymerase αの複合体形成が変化していることも明らかになった(Namekawa et al.EJB 2003)。 2.減数第一分裂前期におけるDNA ligase IV、Flap-endnuclease 1の挙動 DNA ligase IV(CcLIG4)、Flap-endnuclease 1(CcFEN-1)についても、減数第一分裂前期への関与が示唆された。また、CcLIG4、CcFEN-1はCcPCNAと共通の挿入配列を有していることも明らかになった(Namekawa et al. Microbiolgy 2003,Yamaguchi et al.FGB in press)。 3.担子菌コプライナスにおけるdsRNAによる遺伝子発現抑制 コプライナスでは今まで、相同組換えによる遺伝子破壊が困難であり、逆遺伝学的解析が困難であった。そこでdsRNAによる遺伝子抑制を試みたところ、減数第一分裂前期に特異的なLIM15/DMC1遺伝子の抑制に成功した。本研究は担子菌におけるRNA interferenceの初の成功例であるとともに、コプライナスにおいて初めて逆遺伝学的解析の可能性を示した(投稿準備中)。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Satoshi Namekawa: "Dissociation of DNA polymerase α-primase complex during meiosis in Coprinus cinereus"European Journal of Biochemistry. 270. 2137-2146 (2003)
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[Publications] Satoshi Namekawa: "Coprinus cinereus DNA ligase I during meiotic development"Biochimica et Biophysica Acta. 1627. 47-55 (2003)
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[Publications] Satoshi Namekawa: "DNA ligase IV from a basidiomycete, Coprinus cinereus, and its expression during meiosis"Microbiology. 149. 2119-2128 (2003)
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[Publications] Taiki Yamaguchi: "Expression of Flap endonuclease-1 during meiosis in a basidiomycete, Coprinus cinereus"Fungal Genetics and Biology. in press.