2003 Fiscal Year Annual Research Report
Rad17,Ddc1,Mec3の減数分裂期における機能解析
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03J04338
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
酒井 賀津子 大阪大学, 大学院・理学研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 減数分裂期組換え / DNA損傷チェックポイント遺伝子 |
Research Abstract |
相同染色体間の交叉型組換えは減数第一分裂で相同染色体を均等に分配するために必須である。我々はこれまでに体細胞分裂期DNA損傷チェックポイント遺伝子が減数分裂期組換えとその制御に関与する事を明らかにしてきた。出芽酵母Rad17,Ddc1,Mec3は体細胞分裂期ではPCNA様複合体を形成し、DNA損傷チェックポイントで機能している。これら因子の減数分裂期組換えにおける機能を明らかにするため、それぞれの染色体上での局在、及びチェックポイント変異株における組換えに関与する蛋白質の染色体上の局在を解析した。まず、rad17,ddc1,mec3単独変異株では組換えに必須の役割を果たすRad51 fociは形成されるが、その解離が野生株に比べ遅れる事が分かった。これはRad17,Ddc1,Mec3がStrand invasion以降の組換えに関与する事を示唆する。さらにDdc1-YFP, Mec3-HAを発現する株を作製し、減数分裂期におけるDdc1,Mec3の染色体上の局在を調べた所、染色体上にfociとして検出できた。これらfoci形成は二重鎖切断を導入するSpo11の機能に依存する。興味深いことにDdc1,Mec3 foci形成は互いの機能に依存しないが、Rad17はDdc1,Mec3のfocus形成に必要である。更にDdc1とMec3 fociは染色体上で必ずしも共局在しない事、ddc1 mec3二重変異株の胞子の生存率がそれぞれの単独変異株よりも低くなる事が明らかになった。これら結果は減数分裂期では体細胞分裂期とは異なりDdc1とMec3が異なる複合体を作り、別の機能を持つ事を示唆している。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] Miki Shinohara, Kazuko Sakai, Akira Shinohara, Douglas K.Bishop: "Crossover Interference in Saccharomyces cerevisae Requires a TID1/RDH54 and DMC1-Dependent Pathway"Genetics. 163. 1273-1286 (2003)
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[Publications] Miki Shinohara, Kazuko Sakai, Tomoko Ogawa, Akira Shinohara: "The Mitotic DNA Damage Checkpoint Proteins Rad17 and Rad24 Are Required for Repair of Double-Strand Breaks During Meiosis in Yeast"Genetics. 164. 855-865 (2003)