2003 Fiscal Year Annual Research Report
多様な生理機能を支えるGnRH情報伝達系の研究-コロニー形成率制御との関わり-
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03J11884
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
榎本 匡宏 東京大学, 大学院・理学系研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | GnRH / GnRH受容体 / コロニー形成率 / 細胞増殖 / Gタンパク質共役型受容体 / 細胞内情報伝達 |
Research Abstract |
脊椎動物の生殖機能における中心的な制御因子であるGnRHは、近年の研究の進展により細胞の種類に依存して増殖を促進あるいは抑制する作用をもつことが示されている。しかしながら、相反する2つの作用の詳細なメカニズムは未だ明らかになっていない。本研究では、コロニー形成率測定系を用い、GnRHが細胞増殖を細胞種依存的に正、負に制御する分子機構を解明することを目的としている。 本年度は、相反する2つの作用を媒介しているGnRH受容体の同定を試みた。実験モデルとして、GnRHによりコロニー形成率が上がるTSU-Pr1(ヒト前立腺癌由来)、Jurkat(ヒトT細胞白血病由来)、逆にGnRHにより下がるDU145(ヒト前立腺癌由来)、HHUA(ヒト子宮癌由来)の4種類の細胞株を用い、リガンド感受性、ヒトGnRH受容体の発現、RNAiによってGnRH受容体の発現を抑制したときのGnRH作用効果を解析した。その結果、GnRHによりコロニー形成率が上がる細胞と下がる細胞では明らかに異なるリガンド感受性を示すことがわかった。また、4種の細胞株すべてにおいてI型、II型及びII型splice variantの3つが発現していたので、RNAiによりそれぞれの発現を抑制してGnRHの作用効果を調べたところ、「正、負両方の作用にI型GnRH受容体は必須であること」、「II型GnRH受容体splice variantは細胞が正、負どちらの反応を示すかに関わっていること」が明らかになった。 さらに、将来的に、細胞増殖を制御するGnRHの活性がヒトのみならず多種のGnRH受容体を介しても検出されるものであるのかを解析するための道具として、げっ歯類の中でもヒトと同様の完全性周期をもつモルモット、そしてGnRH受容体がまだ同定されていない爬虫類のヒョウモントカゲモドキからGnRH受容体を同定し、その構造的、機能的解析を行った。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Masahiro Enomoto: "Proliferation of TSU-Pr1, a human prostatic carcinoma cell line is stimulated by gonadotropin-releasing hormone"Life Sciences. (in press). (2004)
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[Publications] Yukiko Fujii, Masahiro Enomoto (equally contributed): "Molecular identification and characterization of a gonadotropin-releasing hormone receptor in the guinea pig, Cavia porcellus"General and Comparative Endocrinology. (in press). (2004)
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[Publications] Tadahiro Ikemoto: "Identification and characterization of a reptilian GnRH receptor from the leopard gecko"Molecular and Cellular Encdocrinology. Vol.214 Issues 1-2. 137-147 (2004)
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[Publications] Masahiro Enomoto: "Stimulatory and inhibitory regulation of GnRH on cell proliferation of human prostatic carcinoma cell lines, TSU-Pr1 and DU145"Proceedings of the Japan Society for Comparative Endocrinology. 18. 59 (2003)
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[Publications] Masahiro Enomoto: "Cloning and characterization of a guinea pig GnRH receptor"Zoological Science. Vol.20,No.12. 1598 (2003)