2004 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
03J61503
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
穴澤 嘉雄 東京大学, 大学院・医学系研究科, 特別研究員(DC2)
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Keywords | p53 / Apoptosis / cDNA microarray / p53-121F |
Research Abstract |
本研究の目的はアデノウイルスp53(Ad-p53)に代わるより強力な遺伝子治療法の開発であり、その結果p53より強力なアポトーシス誘導遺伝子を同定した。p53標的遺伝子は細胞周期停止、DNA修復そしてアポトーシス誘導など多様な機能を有している。特にp53依存性アポトーシスに関与する標的遺伝子の発現誘導には、翻訳後修飾をうけたp53(活性型p53)の必要性が報告されている。Ad-p53遺伝子治療が癌細胞に必ずしもアポトーシスを誘導しない理由がp53の翻訳後修飾にあると考え、p53依存性アポトーシスに関連する遺伝子の同定とその遺伝子を用いた遺伝子治療の可能性を検討した。cDNAマイクロアレイ法を用いて外来性p53により発現誘導があり、さらに外来性活性型p53により発現亢進のあるSTAG1遺伝子を抽出した。マイクロアレイの結果をノザン解析およびウェスタン解析により確認した。一過性の強制発現によるコロニーフォーメーションアッセイの結果、STAG1タンパク質の機能として細胞増殖抑制作用があることが示唆された。そこで培養細胞への遺伝子導入効率を向上させるため、また生体内への遺伝子導入を目的としてアデノウイルスベクターSTAG1を構築した。TUNEL法とFACScanによりアポトーシス誘導活性をAd-p53と比較、Ad-STAG1がp53よりも強力な癌抑制作用を有することを明らかにした.
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Research Products
(1 results)