2004 Fiscal Year Annual Research Report
血小板活性化における顆粒放出の分子メカニズムの解明
Project/Area Number |
04J01244
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
白川 龍太郎 京都大学, 医学研究科・学術振興会特別研究員(DC1)
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Keywords | セロトニン / Rab / GTP結合蛋白質 / streptolysin-O / 血球貪食症候群 / FHL3 / Munc13-4 |
Research Abstract |
血小板は活性化に伴い顆粒を放出するが、濃染顆粒の中にはセロトニンやADPが含まれている。それらは血小板のアゴニスとであり、濃染顆粒放出は、血小板活性化のポジティブフィードバック機構に重要な役割を果たしている。我々は、濃染顆粒放出の分子メカニズムの解明を進めている。細菌毒素streptolysin-Oを用い、形質膜透過型の血小板にし、Ca^<2+>刺激による凝集・顆粒放出解析系を確立した(Methods Enzymol.2005,投稿中)。本年度は、その解析系に大腸菌で生成した種々のRab蛋白質を加えることによって放出を解析し、低分子量GTP結合蛋白質Rab27が濃染顆粒放出に重要であることを見いだし、さらに、その標的蛋白質を血小板細胞質中にアフィニティ精製した。TOF-MS分析にて、Munc13-4と同定した。そして、Rab27-Munc13-4が血小板濃染顆粒放出を制御していることを見出した(JBC,2004)。Munc13-4は神経伝達物質放出の必須促進因子として知られるMunc13ファミリーに属する蛋白質である。我々の知見はMunc13蛋白がRabの直接制御を受ける初めての例である。Munc13-4の変異で家族性血球貪食症候群が生じるが、本邦の小児科グループとの共同研究でperforinのナンセンス変異より症状が比較的軽いことを見出した(Blood,2005)。現在、Munc13-4はC2ドメインやMHDドメインなど種々のドメイン構造を持つが、それらのドメインの果たす役割についての分析を行っている。
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Research Products
(2 results)