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2005 Fiscal Year Annual Research Report

酵素活性点と媒体の疎水性相互評価に基盤を持つリン脂質改質反応の最適化

Research Project

Project/Area Number 04J05335
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

山崎 圭樹  日本大学, 生物資源科学部, 特別研究員(DC1)

KeywordsPhospholipaseA_2 / Phospholipid / W / Omicroemulsion / Emulsion droplet hydrophobicity / Emulsion droplet shape / Emulsion droplet dynamics / Fluorescence analysis / Enzyme conformation
Research Abstract

W/Oマイクロエマルション滴の滴内疎水性・滴の形状・敵のダイナミクスを実験的に明らかにし,それらの物性がPLA_2のフォールディング状態や反応活性に与える影響に関して,定量的に検討した.それらの知見に基づいて,PLA_2のimprinting immobilizationの基本モデルを構築した.
両親媒性成分はリン脂質を用いた.イソオクタン(C_8^*)を主溶媒とし,直鎖型アルコール類(1-butanol;C_4,1-pentanol;C_5,1-hexanol;C_6,1-octanol;C_8)を補助溶媒として有機相を調製した.
疎水性応答プローブであるクマリン343の蛍光波長解析によって検討したW/Oマイクロエマルション滴の滴内疎水性は,系内に可溶化している水分量(W≡[H_2O-mol]/[PC-mol])の増加に伴って徐々に親水的になった.また,W>10においては,滴内はバルクの水相と同じ親水性となることが明らかとなった.成果は,化学工学会第37回秋季大会(2005年,岡山,D216)において公表した.
動的光散乱法によって求められたW/Oエマルション滴の直径は,W値の0.33乗に比例して増大することが明らかとなった.この傾向は,補助溶媒の種類に拘わらず常に一定であった.また,この相関から,リン脂質を用いたW/Oマイクロエマルション系においても,球状の滴が調製可能であることが明らかとなった.成果は,Colloid Surfaces A ; Physicochem.Eng.Aspectsに投稿した.
電気伝導度測定と蛍光偏向解消度測定によって検討されたW/Oマイクロエマルション滴のダイナミクスは,W値の増加に伴って滴間相互作用が強くなり,滴のダイナミクスが低下することが明らかとなった.成果は,Conference Proceedings(7^<th> World Congress on Chemical Engineering,2005,July 10-14,UK, P44-022)において公表した.
蛍光分析とCDスペクトル測定によって検討されたPLA_2の高次構造は,W値の増加によってフォールディングされることが明らかとなった。PLA_2の反応活性は,W値の増加に伴って上昇したことより,高反応活性を呈するPLA_2のフォールディング状態を明らかにした.

  • Research Products

    (2 results)

All 2005 Other

All Journal Article (2 results)

  • [Journal Article] Property of the microinterfacial environment related to reactivity of phospholipaseA_2 in hydrolysis reaction of phosphatidylcholine2005

    • Author(s)
      Keiju Yamazaki
    • Journal Title

      Proceedings CD book of 7^<th> World Congress of Chemical Engineering, Glasgow, Scotland (UK)

      Pages: 6pages(44-022)

  • [Journal Article] Water Solubilization Capacity and Mean Emulsion Size of Phospholipid-Based Isooctane-Alcohol W/O Nano-Scale Emulsion

    • Author(s)
      Keiju Yamazaki
    • Journal Title

      Colloid and Surfaces A : Physicochemical Engineering Aspects (Manuscript No COLSUA-D-06-00103,2006) (Submitted)

URL: 

Published: 2007-04-02   Modified: 2016-04-21  

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