1993 Fiscal Year Annual Research Report
熱耐性RecA蛋白質を用いた組換えの分子機構の研究
Project/Area Number |
05044132
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
小川 英行 大阪大学, 理学部, 教授 (70028207)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
MINICASIMOVI イバチュリン ファ ペテルスブルグ核物理学研究所, 分子放射線生物学部門, 研究員
KONSTANTINOV カボエフ オレ ペテルスブルグ核物理学研究所, 分子放射線生物学部門, 室長
NIKITCHNA Zl ペテルスブルグ物性物理学研究所, 室長
ALEXSEEVICH アレキセエフ アント ペテルスブルグ核物理学研究所, 分子遺伝学, 研究員
ALEXSANDROVI ランゾフ ウ ペテルスブルグ核物理学研究所, 分子遺伝学, 部長
倉光 成紀 大阪大学, 理学部, 教授 (60153368)
伊藤 建夫 大阪大学, 理学部, 助教授 (40051817)
小川 智子 大阪大学, 理学部, 講師 (80028208)
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Keywords | RecA蛋白質 / 好熱菌recA遺伝子のクローニング / 熱安定性RecA蛋白質 / 組換え機構の普遍性 / RecA蛋白質の構造と機能の関連 |
Research Abstract |
遺伝的組換えは、遺伝情報の編成替を行って生物の多様性をますと共に、DNA障害の修復にも関与して生命の維持に必須の役割をしている。我々が活性を発見した大腸菌のRecA蛋白質は、組換え反応のなかで中心的な役割をしている明らかになった。今回我々は更に、これと相同な蛋白質をコードする遺伝子が、ヒトを始めあらゆる生物に共通に存在することを明らかにし、RecA蛋白質の行う組換え機構が生物に普遍的であることを示唆した。RecA蛋白質の行う組換えの分子機構を明らかにする上で、現在最も焦眉の研究テーマは、この蛋白質の構造変化と機能との関連を明らかにすることである。しかし現在、構造変化を測定するための物理化学的測定に耐えうる熱に安定なRecA蛋白質がない。熱安定な蛋白質を得る有力な材料は高度好熱菌であるが、ロシアのランゾフ博士等が多数の好熱菌を1982年以来、国後、択捉両島で採集して持っており、相談の結果共同研究を行い、その中から最も適した材料を選択することに合意した。本年は10月からランゾフ博士等4名が好熱菌を携えて来日し、我々の研究室でRecA遺伝子のクローニングを行った。先ず好熱菌を温度耐性が50℃、75℃、それ以上のものの3種類にわけた。RecAでアミノ酸配列が最も保存されている部分の塩基配列を選び、そこをアミノ酸配列を変えずに更に熱耐性の生物に特徴的なGCに富んだ配列に部分変更してプライマーとし、熱安定性の異なる3種類の好熱菌のDNAを鋳型にPCR法でクロニングを行った。それぞれ部分的なrecA遺伝子の配列をえ、現在完全長のrecA遺伝子のクローニングをおこなっている。また好熱菌の、国後、択捉に於ける分布と我が国の温泉における分布を比較する為、北海道の阿寒、登別両温泉及び九州の別府温泉にでかけ好熱菌の採集を行った。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] T.Ogawa,A.Shinohara,A.Nabetani,T.Ikeya,X.Yu,E.H.Egelman and H.Ogawa: "RecA-like Recombination Proteins in Eukarvotes:Functions and structures of RAD 51 Genes" Cold Spring HarborSymp.Quant.Biol. in press. 58.
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[Publications] H.Kurumizaka,S.Ikawa,T.Ikeya,T.Ogawa and T.Shibata: "A Chimeric RecA protein exhibits altered double-stranded DNA binding" J.Biol.Chem.269. 3068-3075 (1994)
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[Publications] O.Bezzubova,A.Shinohara,R.G.Muueller,H.Ogawa and J-M.Buerstedde: "A chicken RAD51 homologue is expressed at high levels in lymphoid and reproductive organs" Nucleic Acids Research. 21. 1577-1580 (1993)
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[Publications] A.Shinohara,H.Ogawa,Y.Matsuda,N.Ushio,K.Ikeo and T.Ogawa: "Clonig of Human,Mouse and Fission Yeast Recombination GeneT7 Homologous to RAD51 and recA" Nature Genetics. 4. 239-243 (1993)
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[Publications] T.Ogawa,X.Yu,A.Shinohara and E.H.Egelman: "Similarity of the Yeast Rad 51 Filament to the Bacterial RecA Filament" Science. 259. 1896-1899 (1993)
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[Publications] M.Ajimura,S-H.Leem and H.Ogawa: "Identification of new genes required for meiotic recombination in Saccharomyses cerevisiae" Genetics. 133. 51-66 (1993)