1993 Fiscal Year Annual Research Report
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05271212
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
蛯名 洋介 徳島大学, 酵素科学研究センター, 教授 (00112227)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
村上 尚 徳島大学, 酵素科学研究センター, 助手 (40210009)
林 日出喜 徳島大学, 酵素科学研究センター, 助手 (10218589)
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| Keywords | GTP結合蛋白質 / トランスロケーション / グルコーストランスポーター / インスリン |
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| Research Abstract |
インスリンは標的細胞においてグルコーストランスポータータイプ4(GLUT4)を細胞内の膜分画から細胞膜上にtranslocationすることにより、グルコースの取り込みを促進する。
我々が新しく開発した細胞系に、PI3-キナーゼのinhibitorであるワートマニン(50nM)加えると、インスリン刺激によるPI-3キナーゼ活性と共にGLUT4のトランスロケーションも完全に押さえられることからPI-3キナーゼはGLUT4のtranslocationに関与している可能性が高い。さらに、GTP-γ-S添加でGLUT4がtranslocationすることから、GLUT4のtranslocationにはGタンパク質が関与していることは確実と思われるが、その1つとしてrabファミリーが注目されている。そこで、ほとんどのrabファミリーを不活性型にすると考えられているrab GDIを大量に発現しているクローンを確立した。しかし、インスリン刺激によるGLUT4のトランスロケーションには全く影響を与えなかった。このことは通常Exocytosisに広く係わっていると考えられているrabファミリーはGLUT4のトランスロケーションに関与していない可能性が高い。またdominant negativeとpositiveのrasを我々の細胞系に大量に強制発現させてもインスリンによるGLUT4のトランスロケーションには影響を与えないことから、ras及びその下流にあると考えられるMAPキナーゼが関与する可能性も低くなった。そこでGLUT4のトランスロケーションがNaFで引き起こされることから三量体Gタンパクの関与を考える必要が生じてきたと思われる。
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[Publications] Nishiyama,T.,Ebina,Y.et al.: "Expression of the gene encoding the tyrosine kinase-deficient human insulin receptor in transgenic mice" Gene in press.
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[Publications] Kanai,F.,Ebina,Y.et al.: "Insulin-stimulated GLUT4 translocation is relevant to the phosphorylation of IRS-1 and the activity of PI3-kinase" Biochem.Biophys.Res.Commun.195. 762-768 (1993)
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[Publications] Kanai,F.,Ebina,Y.et al.: "Direct demonstration of insulin-induced GLUT4 translocation to the surface of intact cells by insertion of a c-myc epitope into an exofacial GLUT4 domain" J.Biol.Chem.268. 14523-14526 (1993)
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[Publications] Hayashi,H.,Ebina,Y.et al.: "The α-type 85-kDa subunit of phosphatidylinositol 3-kinase is phosphorylated at tyrosines 368,580,and 607 by the insulin receptor." J.Biol.Chem.268. 7107-7117 (1993)
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[Publications] 林日出喜、蛯名洋介他: "実験医学" 羊土社, 10 (1993)
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[Publications] 林日出喜、蛯名洋介他: "実験医学" 羊土社, 9 (1993)
