アンジオテンシン依存性マクロファージ由来平滑筋細胞増殖抑制因子の構造と生理作用

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05670595
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 上原 誉志夫 東京大学, 医学部(病), 助手 (40184965)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石光 俊彦 獨協医科大学(病), 講師 (80232346) ; 松村 雅幸 東京大学, 医学部(病), 医員 ; 永田 泰自 東京大学, 医学部(病), 医員
• Keywords: 増殖抑制因子 / angiotensinII / 血管平滑筋細胞 / angiotensinI / cytokines / DNA / peptides

Research Abstract

当該年度における研究にからangiotensinIIの存在はラット腹腔内から採取されたmacrophageを刺激して培養血管平滑筋細胞の増殖を抑制する因子を用量依存的に産生させることが明らかとなった。本因子の産生はangiotensinIIに特異的であり。angiotensinI,endothelinおよびthromboxaneA2などの血管作動性因子ではこのような阻害因子活性が産生されない。細胞増殖周期の同調法を用いた解析から、本阻害因子の増殖抑制機序はデオキシリボ核酸(DNA)合成期におけるDNA産生が阻害されることにあり、interferon-gammaやTGF-βのそれとは抑制機序を異にすることが明らかとなった。AngiotensinIIが関与するG2/M期には影響を与えない。また、angiotensinIIsubtype-1受容体の拮抗薬であるDup-753では本阻害活性の産生が影響を受けず、angiotensinII subtype-2受容体を介する作用であることも明らかとなった。さらに、われわれはcondition mediumを用いて本阻害因子の精製を試み、本阻害因子の分子量が2-50,000daltonsにあるpeptidesであることを明らかにした。Pooled condition mediumを分子量1000を濾過限界とするmembrane sieveを用いて約30倍に濃縮し、さらにgel permeationHPLCとion-exchangeHPLCとを連続的に行って部分精製を試みたところ本阻害因子が分子量の異なる二つの物質からなることが示された。現在、condition mediumを大量に作成して本阻害因子の純化を試みており、アミノ酸配列の決定と核酸配列の解析へと展開している。

Research Products

• [Publications] Yoshio Uehara: "Radical scavengers of cicletanine and renal protection in Dahl salt sensitive rats" American Journal of Hypertension. 6. 463-472 (1993)
• [Publications] Yoshio Uehara: "Alterations in receptor-mediated activation of phospholipase A2 in Dahl salt-sensitive rats" Hypertension Research. 16. 105-111 (1993)
• [Publications] Yoshio Uehara: "De novo synthesis of phospholiase A2 and prostacyclin production by proliferating rat smooth muscle cells" Prostaglandins. 46. 331-346 (1993)
• [Publications] Yoshio Uehara: "Inhibition of protein synthesis and antiproliferating effect by angiotensin converting enzyme inhibitor in rat VSMC" Journal of Hypertension. 11. 1073-1081 (1993)
• [Publications] Yoshio Uehara: "Oxygen radical scavengers and renal protection by indapamide diuretic in salt-induced hypertension of Dahl strain rats" Journal of Cardiovascular Pharmacology. 22(suppl6). S42-S46 (1993)
• [Publications] Toshihiko Ishimitsu: "Antihypertensive effect of interleukin-2 in salt-sensitive Dahl rats" Hypertension. 23. 68-73 (1994)
• [Publications] Yoshio Uehara: "A novel inhibitory factor(s) for vascular smooth muscle cell growth released from angiotensin stimulated macrophages in rat" Gardiner-Caldwell Communications Ltd.,Hong-Kong(in press), (1994)
• [Publications] Nobuhito Hirawa: "Differential effects between angiotensin converting enzyme inhibition and angiotensin receptor antagonism on renal injury in Dahl salt-sensitive rats" Gardiner-Caldwell Communications Ltd.,Hong-Kong(in press), (1994)