1993 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
05680628
|
Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
Principal Investigator |
升田 裕久 理化学研究所, バイオデザイン研究グループ, 基礎科学特別研究員 (30260219)
|
Keywords | 微小管 / 細胞周期 |
Research Abstract |
細胞内における微小管の構築は、細胞周期によって制御されている。間期に形成される細胞質微小管は,分裂期の開始時に脱重合し,分裂極から重合した微小管からなる紡錘体に再編成される。分裂酵母を用いて、分裂極を構成するSpindle Pole Body(SPB)の機能とその細胞周期による制御機構について明らかにすることが本研究の目的である。SPBの微小管形成能力は,間期に不活性化され,分裂期の開始時に活性化される。活性化のメカニズムを調べるために,分裂酵母間期細胞の不活性型SPBをアフリカツメガエル卵分裂期抽出液を用いて活性型に変換できるcell-free系を用いた。すでに、活性化は抽出液中のcdc2キナーゼにより間接的に制御されていることが明らかになっている。平成5年度において以下の結果を得た。1.フォスファターゼ阻害剤存在下で抗体を用いてcdc2キナーゼを除いたツメガエル卵分裂期抽出液はSPB変換活性をもち、その活性はキナーゼ阻害剤で抑制されるので、cdc2キナーゼと異なるキナーゼが活性化に必要であることがわかった。2.SPBの構成成分であるガンマチューブリンに対する抗体がSPBからの微小管形成を阻害することから、ガンマチューブリンが微小管重合核の構成成分であることが明らかになった。3.抽出液に大腸菌中で合成した分裂酵母のガンマチューブリンを加えると活性化が阻害されること、ガンマチューブリン結合ビーズで処理した抽出液が変換活性をもたず、ガンマチューブリン結合分画を加えると変換活性が回復することから、ガンマチューブリン結合因子が活性化に必要であることが明らかになった。以上の結果にもとづき、SPBの活性化に必要と思われる2つの因子、cdc2キナーゼと異なるキナーゼおよびガンマチューブリンと結合する因子を同定することを現在試みている。
|
Research Products
(1 results)