チラコイド膜局在性イミュノフィリンおよび相互作用するタンパク質の生理機能の解明

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05F05449
• Research Institution: Tokyo Institute of Technology
• Principal Investigator: 久堀 徹 東京工業大学, 資源化学研究所, 助教授
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): ROMANO P G. 東京工業大学, 資源化学研究所, 外国人特別研究員
• Keywords: イミュノフィリン / 葉緑体 / TAPタグ / 蛋白質間相互作用

Research Abstract

本研究では、葉緑体チラコイド膜ルーメンに存在するイミュノフィリンの生化学的な性質および生理学的な重要性を明らかにすることを目指している。特に、イミュノフィリン蛋白質が相互作用する相手の同定を研究目的の一つにおいており、本年度は、10月下旬に来日して以来、下記のような研究を実施した。
(1)葉緑体由来7種類のイミュノフィリンの発現系を構築した。
(2)これらのプラスミドで大腸菌を形質転換し、可溶性の蛋白質を得て、活性測定および抗体の作成を行った。
(3)新たに作成した抗体を用いて、野生型および変異イミュノフィリンで形質転換したシロイヌナズナについてチラコイド膜タンパク質の分析を行った。
(4)タンデムアフィニティー精製用タグをもった5種類の葉緑体イミュノフィリンの発現系を構築し、シロイヌナズナの形質転換を行った。