2006 Fiscal Year Annual Research Report
単一細胞観測システムを用いた細胞への化学物質ダイナミクス解析法の開発
Project/Area Number |
05J00115
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Research Institution | National Institute of Advanced Industrial Science and Technology |
Principal Investigator |
關根 朝美 独立行政法人産業技術総合研究所, 環境管理技術研究部門, 特別研究員(PD)
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Keywords | 細胞ハンドリング / キャビラリー電気泳動 / MALDI-MS / インターフェース / 微生物分離同定 / バイオマーカー |
Research Abstract |
細胞ハンドリング技術の一つとして、生きたままの微生物細胞を迅速に分離できるキャピラリー電気泳動(CE)に着目した研究を行った。分離した微生物試料の検出に微生物同定法として着目されているマトリックス支援レーザー脱離イオン化-質量分析法(MALDI-MS)を適用し、微生物の迅速分離同定技術としても有用なシステムの構築を目指した。今回構築したCE/MALDI-MS測定システムはCEで達成された高い分離度を損なうことなく分離試料をマトリックス試薬と混合し、MALDIプレートに転写が可能となるように連続塗布を行う新規インターフェースを構築、採用した。本システムの評価にはXY方向にプレートを移動させて各位置におけるマススペクトルを取得する手法であるイメージングMSを採用し、プレートに塗布した試料の分布や分離度による評価を可能とした。微生物細胞を試料とした場合については、CEで分離した後にインターフェース部でマトリックス液と混合しながら細胞からバイオマーカー成分を抽出および検出するシステムとして既に特許を出願している。大腸菌や酢酸菌を対象とし、構築したCE/MALDI-MSシステムを用いて各微生物の細胞内タンパク質に由来すると考えられるピークを検出することができた。本システムによって複数の微生物の中から目的の微生物を分離・分取することが可能となり、かつ細胞内タンパク質をバイオマーカーとすることにより分離した微生物を同定する手法としての可能性を示すことができた。
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