1994 Fiscal Year Annual Research Report

発生工学を応用した小胞体輸送機構の研究-LDL受容体を発現するトランスジェニックマウスを用いて-

Research Project

Project/Area Number	06248215
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	横出正之京都大学, 医学部, 講師 (20252447)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	上田之彦京都大学, 医学部, 助手 (70252434) 久米典昭京都大学, 医学部, 助手 (20252455) 土井俊夫京都大学, 医学部, 講師 (60183498)
Keywords	LDL受容体 / 肝細胞 / 選別輸送 / トランスジェニックマウス / コレステロール代謝 / 動脈硬化
Research Abstract	虚血性心疾患に代表される粥状動脈硬化疾患に深く関わるLDLの血中値の調節に深く関わる肝細胞のLDL受容体の構造機能連関を解析することを目的として、野性型およびソーティング異常受容体を発現するトランスジェニックマウスの作出を目指してきた。この目的のため受容体のリガンド結合領域のなかでも種特異性の極めて高い11アミノ酸からなる配列に着目し、この配列部分のみをラット受容体の対応する配列で置き換えたキメラ受容体組み替え遺伝子を遺伝子工学的方法を用いて作成し、さらにそれぞれの置換配列に対する抗体を新たに作成し野性型およびソーティング異常LDL受容体を選択的に検知しうるかどうか検討をおこなった。 (1)野性型およびソーティング異常LDL受容体を識別するために識別配列としてラットLDL受容体の一部と置換したヒト/ラット・キメラLDL受容体遺伝子を構築した。 (2)野性型受容体およびソーティング異常キメラLDL受容体を発現するCHO細胞株を確立したところ、野性型受容体と比べ受容体の基本機能はよく保存されていることが示された。 (3)さらにラットおよびヒト受容体の置換部位のアミノ酸配列に対する抗ペプチド抗体をそれぞれ作成したところ、それぞれの分子を明瞭かつ選択的に識別することが明らかになった。 (4)したがってこれらの組み替え遺伝子および抗体を用いることにより本計画の目標である同一細胞内における異なる受容体分子の識別的認識および解析が可能になると考えられる。現在キメラLDL受容体遺伝子を発現するトランスジェニックマウスを作出しつつあり、野性型受容体発現マウスと交配することによりヘテロ結合体モデルマウスの作成をめざしている。

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Masayuki Yokode et al.: "The macrophage and its role in atherogenesis." Internal Medicine. (in press).
[Publications] Makoto Tanaka et al.: "Regulation of apolipoprotein B secretion in hepatocytes from Watanabe heritable hyperlipidemic rabbit,an animal model for familial hypercholesterolemia." Atherosclerosis. (in press).
[Publications] Masayuki Yokode et al.: "Cigarette smoke and lipoprotein modification:a possible interpretation for development of atherosclerosis." Ann.N.Y.Acad.Sci.748. 294-300 (1995)
[Publications] Noriaki Kume et al.: "Lysophosphatidylcholine transcriptionally induces growth factor gene expression in cultured human and rabbit arterial endothelial cells." J.Clin.Invest.93. 907-911 (1994)
[Publications] Masayuki Yokode et al.: "Excerpta Medica,Amsterdam" Frontiers of reactive oxigen species in biology and medicine(Eds.Koji Asada and Toshikazu Yoshikawa), 517-520 (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

発生工学を応用した小胞体輸送機構の研究-LDL受容体を発現するトランスジェニックマウスを用いて-

Principal Investigator

横出 正之 京都大学, 医学部, 講師 (20252447)

Research Products

[Publications] Masayuki Yokode et al.: "The macrophage and its role in atherogenesis." Internal Medicine. (in press).

[Publications] Makoto Tanaka et al.: "Regulation of apolipoprotein B secretion in hepatocytes from Watanabe heritable hyperlipidemic rabbit,an animal model for familial hypercholesterolemia." Atherosclerosis. (in press).

[Publications] Masayuki Yokode et al.: "Cigarette smoke and lipoprotein modification:a possible interpretation for development of atherosclerosis." Ann.N.Y.Acad.Sci.748. 294-300 (1995)

[Publications] Noriaki Kume et al.: "Lysophosphatidylcholine transcriptionally induces growth factor gene expression in cultured human and rabbit arterial endothelial cells." J.Clin.Invest.93. 907-911 (1994)

[Publications] Masayuki Yokode et al.: "Excerpta Medica,Amsterdam" Frontiers of reactive oxigen species in biology and medicine(Eds.Koji Asada and Toshikazu Yoshikawa), 517-520 (1994)

横出正之京都大学, 医学部, 講師 (20252447)