1995 Fiscal Year Annual Research Report

新規細胞内情報伝達物質「環状ADPリボース」の定量法の開発

Research Project

Project/Area Number	06557129
Research Institution	The University of Tokyo (Faculty of Pharmaceutical Sciences)
Principal Investigator	堅田利明東京大学, 薬学部, 教授 (10088859)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	星野真一東京大学, 薬学部, 助手 (40219168) 櫨木修東京大学, 薬学部, 講師 (80142751)
Keywords	NAD / 環状ADPリボース / NAD代謝酵素 / ADPリボース環化酵素 / ヒトリンパ球表面抗原CD38 / ラジオイムノアッセイ / 情報伝達
Research Abstract	我々は先に、NAD^+を基質とした細菌毒素の触媒するG蛋白質のADPリボシル化の研究を背景に、レチノイン酸(RA)によるHL-60細胞の好中球への分化過程にNAD^+分解酵素が誘導され、その酵素がヒトリンパ球表面抗原のCD38分子によることを明らかにした。CD38はアメフラシの卵精巣より単離されたADPリボース環化酵素と構造上類似し、さらに生成物である環状ADPリボースは、IP_3と同様にある細胞内プールからCa^<2+>を放出させる作用をもつことから、この新規環状ヌクレオチドは細胞内で新たなシグナル分子として機能することが期待された。そこで、環状ADPリボースの合成と分解に関わる基礎的な研究の展開と、シグナル分子としての生理的役割を立証する一つの手段として、環状ADPリボース量を高感度に測定する方法の開発を目的とし、以下の点を明らかにした。1.アメフラシの環状ADPリボース合成酵素は、環状ADPリボースとニコチンアミドから効率よくNAD^+を生成(逆反応が進行)し得る″lyase″の特性を有し、CD38の触媒するNAD^+分解酵素とは異なった。2.しかしながら、CD38にZn^<2+>が作用すると、そのNAD^+分解活性が抑制され、ADPリボース環化活性は逆に促進された。すなわち、Zn^<2+>によるCD38の酵素特性の転換が認められた。3.本研究によって開発された環状ADPリボースのラジオイムノアッセイ系を用いて、いくつかの細胞の環状ADPリボース動態を解析した結果、CD38の発現誘導と相関して細胞内にその蓄積が観察された。また、その蓄積は多くの場合、細胞内の顆粒画分に認められた。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Kiyoshi Inageda: "Enzyme property of Aplysia ADP-ribosyl cyclase: Comparison with NAD glycohydrolase of CD38 antigen." J. Biochem.117. 125-131 (1995)
[Publications] Yoshiharu Ohoka: "Involvement of pertussis toxin-sensitive mechanism in retinoic acid-induced differentiation of human leukemic HL-60 cells." J. Biochem.117. 190-196 (1995)
[Publications] Tomohiko Maehama: "NAD^+-dependent ADP-ribosylation of T-lymphocyte alloantigen RT6.1 reversibly proceeding in intact rat lymphocytes." J. Biol. Chem.270. 22747-22751 (1995)
[Publications] Katsunobu Takahashi: "Accumulation of cyclic ADP-ribose measured by a specific radioimmunoassay in differentiated human leukemic HL-60 cells with all-trnas-retinoic acid." FEBS Lett.371. 204-208 (1995)
[Publications] Hideo Kuribara: "Synergistic activation of rat brain phospholipase D by ADP-ribosylation factor and rhoA p21, and its inhibition by Clostridium botulinum C3 exoenzyme." J. Biol. Chem.270. 25667-25671 (1995)
[Publications] Kenji Kontani: "Tyrosine phosphorylation of the c-cbl proto-oncogene productmediated by cell surface antigen CD38 in HL-60 cells." J. Biol. Chem.271(in press). (1996)
[Publications] Toshiaki Katada: "Handbook of Natural Toxins. Vol. 8: Bacterial Toxins and Virulence Factors in Disease (J. Moss, B. Iglewski, M. Vaughan and T. A. Tu, eds.)" Marcel Dekker, Inc., 627 (1995)
[Publications] 堅田利明: "GTP結合蛋白質 (高井義夫、堅田利明、成宮周編)" 羊土社, 312 (1996)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

新規細胞内情報伝達物質「環状ADPリボース」の定量法の開発

Principal Investigator

堅田 利明 東京大学, 薬学部, 教授 (10088859)

Research Products

[Publications] Kiyoshi Inageda: "Enzyme property of Aplysia ADP-ribosyl cyclase: Comparison with NAD glycohydrolase of CD38 antigen." J. Biochem.117. 125-131 (1995)

[Publications] Yoshiharu Ohoka: "Involvement of pertussis toxin-sensitive mechanism in retinoic acid-induced differentiation of human leukemic HL-60 cells." J. Biochem.117. 190-196 (1995)

[Publications] Tomohiko Maehama: "NAD^+-dependent ADP-ribosylation of T-lymphocyte alloantigen RT6.1 reversibly proceeding in intact rat lymphocytes." J. Biol. Chem.270. 22747-22751 (1995)

[Publications] Katsunobu Takahashi: "Accumulation of cyclic ADP-ribose measured by a specific radioimmunoassay in differentiated human leukemic HL-60 cells with all-trnas-retinoic acid." FEBS Lett.371. 204-208 (1995)

[Publications] Hideo Kuribara: "Synergistic activation of rat brain phospholipase D by ADP-ribosylation factor and rhoA p21, and its inhibition by Clostridium botulinum C3 exoenzyme." J. Biol. Chem.270. 25667-25671 (1995)

[Publications] Kenji Kontani: "Tyrosine phosphorylation of the c-cbl proto-oncogene productmediated by cell surface antigen CD38 in HL-60 cells." J. Biol. Chem.271(in press). (1996)

[Publications] Toshiaki Katada: "Handbook of Natural Toxins. Vol. 8: Bacterial Toxins and Virulence Factors in Disease (J. Moss, B. Iglewski, M. Vaughan and T. A. Tu, eds.)" Marcel Dekker, Inc., 627 (1995)

[Publications] 堅田利明: "GTP結合蛋白質 (高井義夫、堅田利明、成宮周 編)" 羊土社, 312 (1996)

堅田利明東京大学, 薬学部, 教授 (10088859)

[Publications] 堅田利明: "GTP結合蛋白質 (高井義夫、堅田利明、成宮周編)" 羊土社, 312 (1996)