PCR in situ hybridization法の確立について

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06770679
• Research Institution: Jikei University School of Medicine
• Principal Investigator: 竹内 常道 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (00236423)
• Keywords: PCR / ヒト乳頭腫ウィルス / 尖形コンジローマ / ボ-エン様丘疹症

Research Abstract

あらかじめヒト乳頭腫ウィルスDNAが検出されている尖形コンジローマ、ボ-エン様丘疹症の切片を用いて、ウィルスに特異的なプライマーでDNAを増幅した。更にビオチンでラベルされたHPV DNAプローブでin situ hybridizationを行った。
凍結組織からのDNAでは充分にウィルスDNAが増幅されたが、パラフィン切片ではHPVの型によっては増幅のみられないものもあり、切片作成時のDNAの破壊や固定によるDNAの抽出のしにくさが考えられた。
PCR産物を制限酵素で切断し、その切断パターンをみることによって、HPVの型判定をすることはできたが、PCR in situでは型判定は不可能であった。