分裂酵母の相同組換えにおけるFbh1ヘリケースの機能解析

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06F06416
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 岩崎 博史 Yokohama City University, 大学院・国際総合科学研究科, 教授
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): SIDDIQUE MD. Shahjahan Parvez 横浜市立大学, 国際総合科学研究科, 外国人特別研究員
• Keywords: Fbh1 ヘリカーゼ / 分裂酵母 / 組換え修復 / F-box / ユビキチン / E3 リガーゼ / Rhp51 / タンパク質分解

Research Abstract

本研究では、組換え(修復)における分裂酵母Fbh1の機能の解明を目的としている。Fbh1は出芽酵母には存在せず、ヒトなど高等生物に保存されたFボックスモチーフをもつユニークなヘリケースで、これまでの我々の遺伝学的解析から、Rad51(分裂酵母ではRhp51と呼ばれることもある)による鎖交換反応の前後2つのステップで機能することが示唆されている。さらに、Fボックスを持つことからユビキチン修飾系のE3としても機能し、Rhp51による鎖交換反応に関与するタンパク質をユビキチン化することが予想されている。今年度は、遺伝学的機能解析を重点的に行った。すなわち、ミニ染色体上に一ケ所だけDNA二重鎖切断を人工的に導入できる分裂酵母株を利用し、この二重鎖切断によって出現する組換え体のスペクトラムを検出する系を用いて、Rqh1との機能的差異について特に検討した。その結果、Rqh1変異株と、Fbh1変異株では、組換え修復産物(栄養要求性と薬剤耐性の遺伝的マーカーによる検出)のスペクトラムに大きく変化があった。パルスフィールド電気泳動で染色体の構造的変化を解析した結果、Fbh1変異株で交叉型組換え体が上昇していることが判明した。