2006 Fiscal Year Annual Research Report
精子および体細胞の顕微注入によるブタ、クジラ胚の体外生産
Project/Area Number |
06F06443
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Research Institution | Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine |
Principal Investigator |
福井 豊 帯広畜産大学, 畜産学部, 教授
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
BHUIYAN M.M.U. 帯広畜産大学, 畜産学部, 外国人特別研究員
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Keywords | 発生工学 / 精子 / 体細胞 / バイオテクノロジー / ブタ / クジラ / 胚生産 / 顕微注入 |
Research Abstract |
本研究は、平成18年11月からスタートした。このため、初年度の平成18年度は主に新鮮ブタ未成熟卵子(卵母細胞)の限定培地による体外成熟、及び顕微授精(intracytoplasmic sperm injection ; ICSI)後の卵子の雄雌前核、分割および顕微授精時の種々の卵子活性化法について検討した。以下に得られた成果を列記する。 1)限定培地(TCM 199+0.1%ポリビニュールアルコール:PVA)を基本液にした成熟培養において、種々の卵子培養蜜度(1卵子/5μl、5卵子/25μl、10卵子/50μl、20卵子/100μl)において、有意差のない体外成熟率(各々79、78、77、69%)を得た。さらに、ICSI後の卵子分割率も各々70,75,75,63%と有意差は見られなかったが、胚盤胞への発生率は各々0、4、6、6%と4区とも低率であった。 2)顕微授精時の卵子活性化法については、ICSI後3〜4時間目に7%エタノール(5分)、5μM イオノマイシン,50μMカルシュウム・イオノボアの3種を比較した。対照区として、無処理区、Sham 区、精子のみ注入(ICSI)区を設けた。その結果、ICSI後の雄雌前核形成率は、ICSI区、エタノール区、イオノマイシン区およびカルシュウム・イオノホア区で各々38.4%,35.0%,40.8%,43.1%と有意差は認められなかった。また、体外培養2日目の分割率は、無処理区が他の区よりも有意に(P<0.05)低かったが、他の区では有意差は見られなかった((31.1〜63.5%)。 以上の結果から、1)ブタ未成熟卵子の限定培地を用いた体外成熟率及び顕微授精後の卵子分割率において、卵子培養密度には影響がない事、2)顕微授精時の卵子活性化の有無については、ノーベル法による顕微授精において、卵子活性化処理は必ずしも必要ない事が示された。
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Research Products
(2 results)