2007 Fiscal Year Annual Research Report
ペプチドライブラリを用いたタンパク質架橋酵素ファミリーの至適基配列の解明と展開
Project/Area Number |
06J06701
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Research Institution | Nagoya University |
Principal Investigator |
杉村 禎昭 Nagoya University, 生命農学研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | トランスグルタミナーゼ / ペプチドライブラリ / ファージディスプレイ / タンパク質架橋反応 |
Research Abstract |
トランスグルタミナーゼ(TGase)は、タンパク質中のグルタミン残基とリジン残基(若しくは一級アミン)との間に共有結合を形成する反応を触媒する一群の酵素である。 昨年度までに申請者は、本酵素に対する高反応性基質配列をファージ提示型ランダムペプチドライブラリから探索する手法を確立し、主要なアイソザイムであるTGase 2と血液凝固第XIII因子、それぞれに対して特異的に高い反応性を示すグルタミン残基側の基質配列を取得することに成功している(Sugimura, et. al.,Journal of Biological Chemistry,2006)。 本年度は、まずこれら高反応性基質配列の有用性の一端を示す目的で、TGase 2に対する高反応性基質配列を「糊しろ」として用いる事で、タンパク質の部位特異的標識・固定化が可能であることを報告した域(Sugimura, et. al.,Journal of Biotechnology,2007)。 更に、健全な皮膚の形成・角質化に必須の因子であるTGase 1についても解析を試みた。昆虫細胞-バキュロウィルス系を用いて組換TGase 1を作製し、上述のスクリーニングを行い複数の高反応性配列を取得した。また、この過程で得られたTGase 1特異的高反応性醜列を用いる事で、組織切片中の.TGase 1活性を特異的かつ高感度に検出する事が可能と成った。(Sugimura, et. al.,9th InternationalConference on Protein Crosslinking and Transglutaminases,Morocco,2007にて発表、投稿準備中)。なお、同じく皮膚角質形成に関与するTGase 3とTGase 5についても、現在解析を進めているところである。
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Research Products
(6 results)
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[Journal Article] Identification of substrates for transglutaminase in Physarum polycephalum,an acellular slime mold,upon cellular mechanical damage2007
Author(s)
Fumitaka Wada, Hiroki Hasegawa, Akio Nakamura, Yoshiaki Sugimura, Yoshiki Kawai, Narie Sasaki, Hideki Shibata, Masatoshi Maki, Kiyotaka Hitomi
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Journal Title
FEBS Journal 274
Pages: 2766-2777
Peer Reviewed
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