2006 Fiscal Year Annual Research Report
マウス肺気腫モデルにおける肺炎球菌感染時の生体反応の機序解明
Project/Area Number |
06J52143
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Research Institution | Yamagata University |
Principal Investigator |
東海林 佳兼 山形大学, 大学院医学研究科, 特別研究員(DC2)
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Keywords | 肺気腫 / Toll-like receptor / SP-A / SP-D / BAL |
Research Abstract |
(方法)8週齢ICRマウスに全身麻酔の上、経気管的にブタ膵エラスターゼ6Uを投与し気腫肺を作成する。3週間後、経気管的に肺炎球菌(10^3-10^5 cfu/mouse)を投与する。投与後0、6、12、24時間後、正常肺群と気腫肺群に気管支肺胞洗浄(BAL)を施行し、BAL液内の細胞成分を比較する。また、BAL液中サイトカイン濃度、肺組織固定標本、RT-PCRを用いて、両群の、mannose receptor、scavenger receptor、surfactant protein (SP)-A、SP-D、Toll-like receptor(TLR)-2、-4などの発現を比較検討する。(結果)組織固定標本では、正常肺に比べ、気腫肺では感染超早期の好中球浸潤が著明であった。固定標本を免疫染色したところ、気腫肺群でTLR-2、-4共に有意に発現が上昇していた。RT-PCRでは、mannose receptorのmRNAの発現は気腫肺で高く、感染時に増加したが、scavenger receptor、SP-A、SP-Dの発現は、感染24時間後では有意な変化は示さなかった。TLR-2、-4の発現は気腫肺群で有意に上昇していた。ウェスタン・プロット法でSP-A、SP-Dの定量を行った。正常肺群、気腫肺群共にSP-A, SP-Dは、感染後早期に低下したが、両群間で有意差は認めなかった。BAL液中サイトカイン濃度は、感染超早期は、気腫肺群で有意にサイトカイン濃度が上昇していた。(結果)気腫肺では、TLRの発現が上昇し、感染超早期の著明な炎症に関与している可能性があることが示された。
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