1996 Fiscal Year Annual Research Report
複製・転写調節因子MSSP群の細胞周期調節機構の解明
| Project/Area Number |
07044213
|
|---|
| Research Institution | Hokkaido University |
|---|
Principal Investigator |
有賀 早苗 北海道大学, 医療技術短期大学部, 教授 (90184283)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
根岸 文子 (財), 佐々木研究所, 研究員 (40177902)
有賀 寛芳 北海道大学, 薬学部, 教授 (20143505)
IVO Galli ベルン大学病院, 研究員
TERESA S.ーF. スタンフォード大学, 医学センター, 教授
|
|---|
| Keywords | 複製 / 転写 / MSSP / C-MYC / 細胞周期 / 酵母 / DNAポリメラーゼ / AMY-1 |
|---|
| Research Abstract |
昨年度までに、複製・転写調節因子MSSP-1およびMSSP-2は範囲内でC-MYC、cdcキナーゼを含む複数のタンパク質と複合体を形成するが、in vitroでDNA複製の主体酵素であるDNAポリメラーゼαと直接結合し、同酵素活性を促進することが判明した。MSSP、C-MYCは互いに直接結合して複合体形成するものの、どちらかというと同一DNA配列の認識やDNAポリメラーゼα、cdcキナーゼ等の同一タンパク質との結合において競合的に働き、それにより複製・転写ならびに細胞周期の調節を行っていることが強く示唆され、MSSPもC-MYCと同様に細胞周期のG1期からS期への進行を制御・確認するライセンス因子であることが示唆されてきていたが、MSSP自身の転写がどのように調節されているかを解明するためにMSSPゲノム遺伝子をクローニングして解析したところ、MSSP遺伝子は非常に多数のエクソンから成る巨大な構造であること、MSSP-1とMSSP-2は同一遺伝子のオルタナティヴスプライシングによる産物であること、並びにMSSP遺伝子の発現は転写プロモーター上流の配列により細胞周期に応じた調節を受けていることが明かになった。また、MSSPを培養細胞に導入して多量に強制発現させるとアポトーシスが起こることを見い出したが、この現象はc-myc発現量と密接に関わっており、ここでもMSSPとc-mycの細胞内バランスが細胞の増殖・死の移行調節を左右していることが示唆された。C-MYCと直接接合するタンパク質を酵母two-hybrid系を用いてさらにスクリーニングした結果、MSSPと同じくC-MYCのN末端付近を認識・結合する新規タンパク質AMY-1のcDNAを得た。AMY-1は転写促進活性を有し、複製促進活性を持つMSSPと競合的に相互作用することにより、細胞周期等に応じてC-MYCの転写および複製因子としての機能を引き出すことが強く示唆された。
|
-
[Publications] 前田順子、平敬宏、北浦広剛、加藤宏幸、有賀(井口)早苗、有賀寛芳: "AMY-1,a novel C-MYC binding protein that stimulates transcriptional activity of C-MYC." Genes and Development. (in press). (1997)
-
[Publications] Christian Haigermoser、藤本充章、有賀(井口)早苗、有賀寛芳: "Cloning and characterization of the genomic DNA of the human MSSP genes." Nucleic Acids Research. 24・(19). 3846-3857 (1996)
-
[Publications] Ivo Galli、Teresa S,-F.Wang、有賀寛芳、有賀(井口)早苗: "MSSP,a partner of C-MYC,activates DNA polymerase alpha by direct interaction" Cancer Detection and Prevention. 20(5). 417- (1996)
-
[Publications] 前田順子、平敬宏、加藤宏幸、有賀(井口)早苗、有賀寛芳: "AMY-1,a novel C-MYC binding protein that stimulates stanscription and transforming activities of C-MYC." Cancer Detection and Prevention. 20(5). 418- (1996)
-
[Publications] 飯田美奈子、平敬宏、有賀寛芳、有賀(井口)早苗: "Induction of apoptosis in HeLa cells by MSSP,c-myc binding proteins." Biological and Pharmacological Bulletin. 20(1). 10-14 (1997)
