1996 Fiscal Year Annual Research Report
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07407004
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| Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
本庶 佑 京都大学, 医学研究科, 教授 (80090504)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
近藤 滋 京都大学, 医学研究科, 講師 (10252503)
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| Keywords | S領域 / 培養細胞株 / 人工プラスミド / subtraction hybridization / ジャーミナルセンター / 塩基配列 |
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| Research Abstract |
in vitroの培養細胞株CH12F3細胞は試験管内でIL-4、TGFβ、CD40Lを加えることによって50%以上の細胞がIgMからIgAにクラススイッチすることを明らかにし、この細胞のクラススイッチによってSμ-Sα組み換えが起こり遺伝子の欠失が起こることを証明した。さらにこの細胞の遺伝子組み換えの部位頻度分布を詳細に検討したことろ遺伝子組み換え点はS領域を中心に前後に広く広がっていること、またI領域内には極めて低頻度でしか組み換えが起こらないことを明らかにした。この結果は、S領域の役割が組み換えの引き金としての役割と実際に切断、つなぎ戻しを行われる場であるのと二つの可能性の内、前者の可能性を強く示唆するものである。ついでCH12F3細胞に人工的に作製したSμとSαをもつプラスミドを導入し、染色体外で遺伝子組み換えの発現誘導を試み、低頻度ではあるが実際にクラススイッチ組み換えが行われることを確認した。現在これをさらに高頻度の組み換えが起こるようにプラスミドを改変中である。新しいクラススイッチ制御遺伝子を単離するためにクラススイッチ刺激を加えたものと加えないものとの間でsubtraction hybridzation法を行った。このために酵素分解を加味した新しいsubtraction法を確立し、特異的に誘導される2種類の遺伝子を単離し現在この意義を解析中である。また先天的にリンパ節及びジャーミナルセンターの形成不能マウスaly/alyマウスの病態を解析し、このネズミにおいてはクラススイッチが極めて起こりにくいことを明らかにした。すなわちクラススイッチが起こるためにはジャーミナルセンターにおけるT、B細胞の協調的制御が必要であることを明らかにした。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Honji,T.et al.: "Immunoglobulin heavy chain loci of mouse and human" Immunoglobulin Genes. 145-171 (1995)
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[Publications] Zhang,J.et al.: "Regulation of class switch recombination of the immunoglobulin heavy chain genes" Immunoglobulin Genes. 235-266 (1995)
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[Publications] Nakamura,M.et al.: "High frequency class switching of an IgM^+ B lymphoma clone CH12F3 to IgA^+ cells" International Immunology. 8. 193-201 (1996)
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[Publications] Shinkura,R.et al.: "Defects of somatic hypermutation and class switching in alymphoplasia (a/y) mutant mice" International Immunology. 8. 1067-1075 (1996)
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[Publications] Matsuda,F.et al.: "Organization of the Human Immunoglobulin Heavy-Chain Locus" Advances in Immunology. 62. 1-29 (1996)
