1995 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子導入によるロタウイルス高感受性細胞の樹立とその診断法への応用
Project/Area Number |
07556121
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Research Category |
Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
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Research Institution | Gifu University |
Principal Investigator |
源 宣之 岐阜大学, 農学部, 教授 (10144007)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉山 誠 岐阜大学, 農学部, 助教授 (80196774)
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Keywords | ロタウイルス / レセプター遺伝子 / クローニング / モノクローナル抗体 / 抗レセプター抗体 / MA-104細胞 / 腸管上皮細胞 / 発現 |
Research Abstract |
1、レセプター遺伝子のクローニングに先立ち、レセプターに対応するウイルス構造蛋白質を同定するために、トリロタウイルス、PO-13株の各構造蛋白質をコードする遺伝子のクローニングを行い、その塩基配列を決定した。また、クロニーングした遺伝子を用いて培養細胞内での発現を行った。(Arch. Virol., 1995. Virology, 1995. Vet. Microbiol., in press. Virology,発表予定) 2、免疫学的手法によって細胞遺伝子ライブラリーよりレセプター遺伝子挿入クローンを選択するために、抗細胞抗体の作出を試みた。すなわち、トリロタウイルスに比較的高い感受性を示すMA-104細胞に対するポリクローナル抗体を作出し、それと抗ロタウイルス抗体と反応させ、抗細胞抗体の中にレセプターに対する抗体のあることを確認した。(第44回日本ウイルス学会発表予定) 3、2、と同様の目的で、MA-104細胞に対するモノクローナル抗体を作出中である。 4、レセプター遺伝子をクローニングするために、幼犬の腸管上皮細胞及び培養細胞の細胞膜からメッセンジャーRNAを抽出し、そのcDNAをpUC19ベクターに導入して細胞遺伝子ライブラリーを構築した。現在、ライブラリーからレセプター遺伝子挿入クローンを選択中である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Ito H.,: "Sequence analysis of cDNA for the VP6 protein of group A avian rotavirus: a comparison with group A mammalian rotaviruses." Archives of Virology. 140. 605-612 (1995)
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[Publications] Rohwedder A.,: "Sequnce analysis of pigeon, turkey, and chicken rotavirus VP8 identifies rotavirus 993/83, isolated from calf feces, as a pigeon rotavirus." Virology. 210. 231-235 (1995)
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[Publications] Ito H.,: "Expression of the major inner capsid protein, VP6, of avian rotavirus in mammalian cells." Veterinary Microbiology. (in press).
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[Publications] Ito H.,: "Mapping of antigenic sites on the major capsid protein of avian rotavirus using Escherichia coli expression system." Archives of Virology. (発表予定).
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[Publications] Rohwedder A.,: "VP7 from rotavirus 993/83 isolated from a calf with diarrhea is closely related to VP7 of pigeon rotavirus PO-13." Virology. (発表予定).
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[Publications] 後藤和男: "トリロタウイルスの細胞レセプターに対する抗体の作出。" 第44回日本ウイルス学会(1996年11月). (発表予定).