1996 Fiscal Year Annual Research Report
IL8抗体のヒト型化とサイトカイン遺伝子調節因子NFkBを標的とした抗炎症剤開発
Project/Area Number |
07557031
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Section | 試験 |
Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
松島 綱治 東京大学, 医学部, 教授 (50222427)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山崎 達美 中外製薬探索研究所, 所長
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Keywords | ケモカイン / 白血球 / インターロイキン8 / 転写因子 / NFkB / IkBα / リン酸化 / 単球走化活性化因子 |
Research Abstract |
本年度は以下の実験結果を得た。1)抗IL8抗体投与によって、好中球浸潤に伴う急性炎症の発生が予防されることを報告してきた。本年度は、より臨床に近いモデルとして、急性呼吸窮迫症候群(ARDS)モデルの確立を試み、このモデルへの抗体の影響を検討した。ウサギの気管内にOK-432を投与36時間後に、リポ多糖類(LPS)を静脈投与した。LPS投与後に、著明な好中球浸潤・フィブリン沈着・血漿滲出を伴う肺胞の破壊が生じ、低酸素血症が認められ、70%のウサギは死亡した。これらの所見はヒトARDSでの所見と一致いていた。この時、肺局所でのIL8産生を示す免疫染色での結果を得たので、OK-432およびLPS投与時に抗IL8抗体を投与したところ、肺での病理変化・低酸素血症の発生は抑制され、死亡率は著明に改善された。以上の結果は、ARDSの発症にIL8が関与しており、抗IL8抗体はARDSの治療薬となりうることを示していた。2)前年度までに抗IL8抗体のヒトIgG1タイプのヒト型化は終了した。しかし、臨床応用した時のFcレセプターを介する反応を軽減することを目的として、これをIgG4タイプのヒト型化抗体に改変した。3)IL8などの炎症性サイトカイン遺伝子活性化を制御している転写因子NFkBの活性化は、IkBのリン酸化に伴い起きる。我々はすでにIkBαのC末端部分の酸性アミノ酸に富んだ部分のリン酸化が、NFkBの活性化に必須であることを報告した。この領域をリン酸化する酵素の精製を試み、その結果、恒常的に活性を示す分子と、リポ多糖類刺激によって活性が亢進する分子の2種があり、前者はカゼイン・キナーゼであるのに対して、後者は未知のキナーゼである可能性を示唆する結果を得た。4)抗体投与実験から、抗基底膜抗体投与によって起きる腎硬化症を伴う腎不全発症への、IL8の近縁分子である単球走化活性化因子の本質的関与を明らかにした。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Wada,T.,Yokoyama,H.and Matsushima,K.et al.: "Intervention of crescentic glomerulonephritis in rats by administering antibodies against monocyte chemotactic and activating factor (MCAF)." FASEB J.10巻. 1418-1425 (1996)
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[Publications] Yano,S.,Yanagawa,H.,and Matsushima,K.et al.: "Th2 cytokines differently regulates monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) production by human peripheral blood monocytes and alveolar macrophages." J.Immunol.157巻. 2660-2665 (1996)
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[Publications] Shono,T.,Ono.and Matsushima,K.et al.: "Involvement of the transcription factor NF-kB in tubular morphogenesis of human microvascular endothelial cells by oxidative stress." Mol.Cell.Biol.16巻. 4231-4239 (1996)
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[Publications] Mukaida,N.,Ishikawa,Y.,and Matsushima,K.et al.: "Novel insight into molecular mechanism of endotoxin shock." J.Leukocyte Biol.59巻. 145-151 (1996)
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[Publications] Harada,A.,Mukaida,N.,and Matsushima,K.: "IL-8 as a novel target for intervention therapy in acute inflammatory diseases." Moi.Med.Today. 2巻. 482-489 (1996)
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[Publications] Kuno,K.,Kanada,N.,and Matsushima,K.et al.: "Molecular cloning of a gene encoding a new type of metalloproteinase-disintegrin family protein with thrombospondin motifs as an inflammation associated gene." J.Biol.Chem.272巻. 556-562 (1997)
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[Publications] Harada,A.,Mukaida,N.,and Matsushima,K.: "Use of blocking antibodies as probes for in vivo functions of chemokines.In A Companion to Methods in Enzymology,vol.10.Sozzani,S.(ed.)" Academic Press,New York,NY,U.S.A., 166-174 (1996)
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[Publications] Harada,A.,Mukaida,N.,and Matsushima,K.: "The role of chemokines in ischemia and reperfusion injury.In Chemokines in Diseases.A.Koch and R.M.Strieter(eds.)." R.G.Landers Company,Austin,Texas,USA, 179-193 (1996)